兔抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。
02698 大鼠堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒 Rat basic fibroblast growth factor 6,bFGF-6 ELISA Kit 96T/48T
02699 大鼠酸性成纖維細胞生長因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒 Rat acidic fibroblast growth factor 1,aFGF-1 ELISA Kit 96T/48T
02700 大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL) ELISA試劑盒 Rat Factor-related Apoptosis ligand,FASL ELISA Kit 96T/48T
02701 大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒 Rat Factor-related Apoptosis,FAS ELISA Kit 96T/48T
02702 大鼠紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒 Rat Erythropoietin,EPO ELISA Kit 96T/48T
02703 大鼠紅細胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒 Rat Erythropoietin receptor,EPOR ELISA Kit 96T/48T
02704 大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒 Rat Eotaxin 1 ELISA Kit 96T/48T
02705 大鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒 Rat eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA Kit 96T/48T
02706 大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒 Rat Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA Kit 96T/48T
02707 大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒 Rat 1,3-βD glucosidase,1,3-βD-Glu ELISA Kit 96T/48T
02708 大鼠可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)酶聯(lián)免疫分析大鼠可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)酶聯(lián)免疫分析體(sEPCR)ELISA試劑盒 Rat soluble endothelial protein C receptor,sEPCR ELISA Kit 96T/48T
02709 大鼠CD30分子(CD30)ELISA試劑盒 Rat Cluster of differentiation 30,CD30 ELISA Kit 96T/48T
02710 大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒 Rat Epithelial-Cadherin,E-Cad ELISA Kit 96T/48T
02711 大鼠β細胞素(BTC)ELISA試劑盒 Rat beta cellulin,BTC ELISA Kit 96T/48T
02712 大鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 Rat Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit 96T/48T
02713 大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒 Rat Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit 96T/48T
02714 大鼠血管生長素(ANG)ELISA試劑盒 Rat Angiogenin,ANG ELISA Kit 96T/48T
02715 大鼠角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒 Rat keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 96T/48T
02716 大鼠*(cAMP)ELISA試劑盒 Rat cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit 96T/48T
02717 大鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒 Rat Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule,ALCAM ELISA Kit 96T/48T
02718 大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit 96T/48T
02719 大鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒 Rat Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA Kit 96T/48T
02720 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒 Rat transforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit 96T/48T
02721 大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒 Rat Progesterone,PROG ELISA Kit 96T/48T
02722 大鼠雌激素(E)ELISA試劑盒 Rat estrogen,E ELISA Kit 96T/48T
02723 大鼠血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 Rat Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
02724 大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 8,IL-8 ELISA Kit 96T/48T
02725 大鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒 Rat adiponectin,ADP ELISA Kit 96T/48T
02726 大鼠游離β絨毛膜*(f-βCG)ELISA試劑盒 Rat free chorionic gonadotropin,f-βCG ELISA Kit 96T/48T
02727 大鼠醛固酮(ALD)ELISA試劑盒 rat aldosterone,ALD ELISA Kit 96T/48T
02728 大鼠*(NA)ELISA試劑盒 rat Noradrenaline,NA ELISA Kit 96T/48T
02729 大鼠前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒 rat Prostaglandin F,PG-F ELISA Kit 96T/48T
02730 大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒 rat Prostaglandin E1,PG-E1 ELISA Kit 96T/48T
02731 大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒 rat Corticosterone,CORT ELISA Kit 96T/48T
02732 大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 rat Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit 96T/48T
02733 大鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒 Rat bradykinin,BK ELISA Kit 96T/48T
02734 大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒 rat Resistin ELISA Kit 96T/48T
02735 大鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒 rat prolactin,PRL ELISA Kit 96T/48T
02736 大鼠促生長激素釋放激素(GRH)ELISA試劑盒 rat growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit 96T/48T
02737 大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 rat adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit 96T/48T
02738 大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 rat follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit 96T/48T
02739 大鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒 rat Estradiol receptor,ER ELISA Kit 96T/48T
02740 大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒兔抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA試劑盒 Rat Pro Atrial Natriuretic Peptide,Pro-ANP ELISA Kit 96T/48T
02741 大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒 Rat Big Endothelin,Big ET ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5兔抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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