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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
02885 豬D二聚體(D2D)ELISA試劑盒 Porcine D-Dimer,D2D ELISA Kit 96T/48T
02886 豬髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒 Porcine myeloperoxidase,MPO ELISA Kit 96T/48T
02887 豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒 Porcine Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA Kit 96T/48T
02888 豬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 Porcine von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit 96T/48T
02889 豬黑色素瘤轉移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒 Porcine melanoma metastasis surface adhesion molecule,MMSAM ELISA Kit 96T/48T
02890 豬可溶性血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒 Porcine soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISA Kit 96T/48T
02891 豬血管內皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)ELISA試劑盒 Porcine Vascular Endothelial-Cadherin Complex,VE-cad ELISA Kit 96T/48T
02892 豬*(NE)ELISA試劑盒 Porcine Noradrenaline,NE ELISA Kit 96T/48T
02893 豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 Porcine angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit 96T/48T
02894 豬凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒 Porcine Factor-related Apoptosis,FAS ELISA Kit 96T/48T
02895 豬B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 Porcine B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA Kit 96T/48T
02896 豬Bcl-2相關X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 Porcine Bcl-2 Assaciated X protein,BAX ELISA Kit 96T/48T
02897 豬一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 Porcine nitric oxide,NO ELISA Kit 96T/48T
02898 豬內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 Porcine Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit 96T/48T
02899 豬內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 Porcine Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA Kit 96T/48T
02900 豬血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 Porcine Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit 96T/48T
02901 豬血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域*激酶2(Tie-2)ELISA試劑盒 Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA Kit 96T/48T
02902 豬血管生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒 Porcine Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit 96T/48T
02903 豬乙酰*受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 Porcine acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit 96T/48T
02904 豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 Porcine Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit 96T/48T
02905 豬熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒 Porcine Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit 96T/48T
02906 豬熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒 Porcine Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA Kit 96T/48T
02907 豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒 Porcine Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA Kit 96T/48T
02908 豬C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒 Porcine C-reactive protein,CRP ELISA Kit 96T/48T
02909 豬可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 Porcine Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA Kit 96T/48T
02910 豬主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/SLAⅡ)ELISA試劑盒 swine major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡ ELISA Kit 96T/48T
02911 豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISA試劑盒 Porcine soluble P-selectin,sP-Selectin ELISA Kit 96T/48T
02912 豬白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 Porcine interleukin 17,IL-17 ELISA Kit 96T/48T
02913 豬髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 Porcine myelin basic protein,MBP ELISA Kit 96T/48T
02914 豬生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 Porcine Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit 96T/48T
02915 豬α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 Porcine Interferon α,IFN-α ELISA Kit 96T/48T
02916 豬磷酸化細胞外信號調節激酶(pERK)ELISA試劑盒 Porcine phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit 96T/48T
02917 豬乙酰*(ACh)ELISA試劑盒 Porcine acetylcholine,ACH ELISA Kit 96T/48T
02918 豬主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA試劑盒 swine major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢ ELISA Kit 96T/48T
02919 豬肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒 Porcine Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA Kit 96T/48T
02920 豬雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒 Porcine Estradiol receptor,ER ELISA Kit 96T/48T
02921 豬補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 Porcine Complement 3,C3 ELISA Kit 96T/48T
02922 豬骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒 Porcine Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA Kit 96T/48T
02923 豬腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒 Porcine Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit 96T/48T
02924 豬脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒 Porcine lipoprotein α,Lp-α ELISA Kit 96T/48T
02925 豬促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒 Porcine thyrotropin-releasing hormone,TRH ELISA Kit 96T/48T
02926 豬抗*受體(ATR)ELISA試劑盒 Porcine anti-thrombin receptor,ATR ELISA Kit 96T/48T
02927 豬組胺(HIS)ELISA試劑盒 Porcine Histamine,HIS ELISA Kit 96T/48T
02928 豬雌二醇(E2)ELISA試劑盒 Porcine Estradiol,E2 ELISA Kit 96T/48T
02929 豬轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 Porcine transforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit 兔纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒96T/48T
02930 豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 Porcine tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit 96T/48T
02931 豬脂聯素(ADP)ELISA試劑盒 Porcine adiponectin,ADP ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5兔纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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