兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

03264 兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 rabbit Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit 96T/48T
03265 鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 Duck Interleukin-8,IL-8 ELISA Kit 96T/48T
03266 鴨白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 Duck Interleukin-4,IL-4 ELISA Kit 96T/48T
03267 鴨白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 Duck Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit 96T/48T
03268 鴨子碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒 Duck carbonic anhydrase,CA ELISA Kit  96T/48T
03269 鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒 Duck anti-prothrombins antibodies,aPT1/aPT2 ELISA Kit  96T/48T
03270 鴨*(cAMP)ELISA試劑盒 Duck cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit  96T/48T
03271 鴨免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 Duck Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 96T/48T
03272 鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒  Duck major histocompatibility complex,MHC ELISA Kit  96T/48T
03273 鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒 Duck virus enteritis,DEV ELISA Kit  96T/48T
03274 鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒  Duck Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit  96T/48T
03275 鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒  Duck Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit  96T/48T
03276 鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 Duck Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit 96T/48T
03277 禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒 Avian encephalomyelitis,AE ELISA Kit 96T/48T
03278 毒蛇因子(CVF) ELISA試劑盒 Cobra venom factor,CVF ELISA Kit 96T/48T
03279 牛蛙生長激素（GH） ELISA試劑盒 bullfrog growth hormone,GH ELISA Kit 96T/48T
03280 家蠶卵黃蛋白(LT) ELISA試劑盒 Bombyx mori Livetin,LT ELISA Kit 96T/48T
03281 蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原（vtg)ELISA試劑盒 Nasoniavitripennis vilogenin,Vtg ELISA Kit 96T/48T
03282 紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白(Lv/Vn)ELISA試劑盒 Cherax quadricarinatus lipovilin/vilin,Lv/Vn ELISA Kit  96T/48T
03283 羅氏沼蝦諾達(dá)病毒(MrNV)ELISA試劑盒 Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV ELISA Kit 96T/48T
03284 α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)ELISA試劑盒  α-bungarotoxin,α-BGT ELISA Kit 96T/48T
03285 大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)ELISA試劑盒  Escherichia coli Protein,E.coli P ELISA Kit 96T/48T
03286 *(AFT)ELISA試劑盒  Aflatoxin,AFT ELISA Kit 96T/48T
03287 蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒  Bacillus thuringiensis,BT ELISA Kit 96T/48T
03288 牛丙酮檢測(acetone)ELISA試劑盒  Bovine acetone ELISA Kit 96T/48T
03289 牛結(jié)核病抗體(TB-Ab)ELISA試劑盒 Elisa 2*96孔
03290 荷蘭賽迪口蹄疫0型2板ELISA試劑盒 Elisa 2*96孔
03291 豬瘟病毒抗體ELISA試劑盒 Elisa 5*96孔
03292 口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA試劑盒 Elisa 5*96孔
03293 豬瘟抗原2板ELISA試劑盒 Elisa 2*96孔
03294 偽狂犬病毒gE2.0抗體ELISA試劑盒 Elisa 5*96孔
03295 藍(lán)耳病ELISA試劑盒 Elisa 5*96孔
03296 圓環(huán)病毒IgGELISA試劑盒 Elisa 5*96孔
03297 綿羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 Sheep Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA Kit 96T/48T
03298 綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 Sheep Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit  96T/48T
03299 綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒 Sheep major histocompatibility complex,MHC ELISA Kit  96T/48T
03300 綿羊白介素6(IL-6)ELISA試劑盒  Sheep Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit  96T/48T
03301 綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 Sheep Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit  96T/48T
03302 綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 Sheep Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit  96T/48T
03303 綿羊補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒 Sheep Complement fragment 3b rccptor,C3bR ELISA Kit  96T/48T
03304 綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 Sheep Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA Kit  96T/48T
03305 猴白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 Monkey Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit  96T/48T
03306 猴白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 Monkey Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit 96T/48T
03307 猴Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒  Monkey Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA Kit 96T/48T

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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