兔血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發，提高試驗質量。
03309 猴透明質酸(HA)ELISA試劑盒 Monkey Hyaluronic acid,HA ELISA Kit 96T/48T
03310 猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒 Monkey β2-microglobulin,BMG/β2-MG ELISA Kit 96T/48T
03311 猴B病毒(BV)ELISA試劑盒 Monkey B virus Infections ELISA Kit 96T/48T
03312 猴載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 Monkey apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit 96T/48T
03313 猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 Monkey apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit 96T/48T
03314 猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 Monkey Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit 96T/48T
03315 猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 Monkey Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit 96T/48T
03316 猴胰島素(INS)ELISA試劑盒 Monkey Insulin,INS ELISA Kit 96T/48T
03317 猴子巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒 Monkey Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA Kit 96T/48T
03318 駱駝β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 Camel Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit 96T/48T
03319 駱駝脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 Camel lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA Kit 96T/48T
03320 駱駝內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 Camel Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit 96T/48T
03321 駱駝轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒 Camel transforming growth factors β2,TGFβ2 ELISA Kit 96T/48T
03322 馬生長激素(GH)ELISA試劑盒 Equine growth hormone,GH ELISA Kit 96T/48T
03323 馬主要組織相容性復合體(MHC/ELA)ELISA試劑盒 Equine major histocompatibility complex,MHC/ELA ELISA Kit 96T/48T
03324 馬免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 Equine Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit 96T/48T
03325 馬β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 Equine amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit 96T/48T
03326 馬β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 Equine Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit 96T/48T
03327 山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 Goat Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA Kit 96T/48T
03328 山羊P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒 Goat P-Selectin/CD62P/GMP-140 ELISA Kit 96T/48T
03329 山羊促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒 Goat growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit 96T/48T
03330 山羊生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒 Goat Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit 96T/48T
03331 山羊白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 Goat Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 96T/48T
03332 山羊白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 Goat Interleukin 10,IL-10 ELISA Kit 96T/48T
03333 山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 Goat Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit 96T/48T
03334 山羊β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 Goat Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit 96T/48T
03335 山羊丙酮檢測(acetone)ELISA試劑盒 Goat acetone ELISA Kit 96T/48T
03336 鹿胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒 Deer Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA Kit 96T/48T
03337 鹿內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 Deer Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA Kit 96T/48T
03338 鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒 Deer Serum amyloid A,SAA ELISA Kit 96T/48T
03339 鹿紅細胞膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒 Deer erythrocyte membrane protein,EMP ELISA Kit 96T/48T
03340 魚孕激素/孕酮（PROG）ELISA試劑盒 PROG ELISA Kit 96T/48T
03341 *(SCT)ELISA試劑盒 Salmon calcitonin,SCT ELISA Kit 96T/48T
03342 魚類甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒 Fish Thyroxine,T4 ELISA Kit 96T/48T
03343 魚雌二醇(E2)ELISA試劑盒 E2 ELISA 96T/48T
03344 魚促腎上腺皮質激素(ACTH)ELISA試劑盒 ACTH ELISA Kit 96T/48T
03345 魚雌激素(E)ELISA試劑盒 E ELISA Kit 96T/48T
03346 魚促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 FSH ELISA Kit 96T/48T
03347 魚促黃體激素(LH)ELISA試劑盒 LH ELISA Kit 96T/48T
03348 魚磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 AMPK ELISA Kit 96T/48T
03349 魚卵黃高磷蛋白(PV)ELISA試劑盒 PV ELISA Kit 96T/48T
03350 魚類主要組織相容性復合體(MHC)ELISA試劑盒 MHC ELISA Kit 96T/48T
03351 鮭魚補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 C3 ELISA Kit 96T/48T
03352 鮭魚補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒兔血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 C4 ELISA Kit 96T/48T
03353 魚類白介素1α（IL-1α）ELISA試劑盒 IL-1α ELISA Kit 96T/48T
03354 魚類白介素1β（IL-1β）ELISA試劑盒 IL-1β ELISA Kit 96T/48T
03355 鯉魚卵黃蛋白原（VTG）ELISA試劑盒 VTG ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5兔血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹的工作作風檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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