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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
3912 人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA Kit,48T/96T
3913 小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA Kit,48T/96T
3914 大鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA Kit,48T/96T
3915 人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA Kit,48T/96T
3916 小鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA Kit,48T/96T
3917 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA Kit,48T/96T
3918 人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA Kit,48T/96T
3919 小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA Kit,48T/96T
3920 裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA Kit,48T/96T
3921 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA Kit,48T/96T
3922 人卵巢癌標志物CA125ELISA Kit,48T/96T
3923 小鼠卵巢癌標志物CA125ELISA Kit,48T/96T
3924 大鼠卵巢癌標志物CA125ELISA Kit,48T/96T
3925 人乳腺癌標志物-CA153ELISA Kit,48T/96T
3926 小鼠乳腺癌標志物-CA153ELISA Kit,48T/96T
3927 大鼠乳腺癌標志物-CA153ELISA Kit,48T/96T
3928 人胃腸癌標志物CA199ELISA Kit,48T/96T
3929 小鼠胃腸癌標志物CA199ELISA Kit,48T/96T
3930 大鼠胃腸癌標志物CA199ELISA Kit,48T/96T
3931 人胰腺癌標志物CA242ELISA Kit,48T/96T
3932 人α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA Kit,48T/96T
3933 小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA Kit,48T/96T
3934 人鱗狀上皮細胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA Kit,48T/96T
3935 人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA Kit,48T/96T
3936 小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA Kit,48T/96T
3937 人胃癌標志物ELISA Kit,48T/96T
3938 人肺癌標志物ELISA Kit,48T/96T
3939 人組織多肽抗原(TPA)ELISA Kit,48T/96T
3940 小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA Kit,48T/96T
3941 大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA Kit,48T/96T
3942 兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA Kit,48T/96T
3943 人泛素蛋白(Ub)ELISA Kit,48T/96T
3944 小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA Kit,48T/96T
3945 人*原A(PG-A)ELISA Kit,48T/96T
3946 人*原C(PG-C)ELISA Kit,48T/96T
3947 人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA Kit,48T/96T
3948 人前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA Kit,48T/96T
3949 小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA Kit,48T/96T
3950 大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA Kit,48T/96T
3951 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA Kit,48T/96T
3952 小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA Kit,48T/96T
3953 人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA Kit,48T/96T
3954 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA Kit,48T/96T
3955 小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA Kit,48T/96T
3956 雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit,48T/96T
3957 人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit,48T/96T
3958 小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit,48T/96T
3959 猴子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit,48T/96T
3960 大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit,48T/96T
3961 兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit,48T/96T
3962 人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA Kit,兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒48T/96T
3963 人基質金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA Kit,48T/96T
3964 人α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA Kit,48T/96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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