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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔子透明質酸(HA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔子透明質酸(HA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子透明質酸(HA)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
5996 人食欲素受體(OXR)ELISA Kit,48T/96T
5997 豬食欲素受體(OXR)ELISA Kit,48T/96T
5998 人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA Kit,48T/96T
5999 豬食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA Kit,48T/96T
6000 牛乙酰乙酸檢測(ACAC)ELISA Kit,48T/96T
6001 雞乙酰乙酸檢測(ACAC)ELISA Kit,48T/96T
6002 大鼠細胞色素P450(CYP450)ELISA Kit,48T/96T
6003 大鼠細胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA Kit,48T/96T
6004 雞傳染性鼻炎抗體(IC)ELISA Kit,48T/96T
6005 禽腦脊髓炎(AE)ELISA Kit,48T/96T
6006 人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA Kit,48T/96T
6007 小鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA Kit,48T/96T
6008 豬生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA Kit,48T/96T
6009 大鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA Kit,48T/96T
6010 豬*(Dex)ELISA Kit,48T/96T
6011 犬血栓前體蛋白(TpP)ELISA Kit,48T/96T
6012 人血栓前體蛋白(TpP)ELISA Kit,48T/96T
6013 小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA Kit,48T/96T
6014 大鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA Kit,48T/96T
6015 人酸性磷酸酶(ACP)ELISA Kit,48T/96T
6016 人抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG)ELISA Kit,48T/96T
6017 人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA Kit,48T/96T
6018 人糖化白蛋白(GA)ELISA Kit,48T/96T
6019 人糖化蛋白(GSP)ELISA Kit,48T/96T
6020 人神經髓鞘蛋白(p2)ELISA Kit,48T/96T
6021 人糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)ELISA Kit,48T/96T
6022 人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA Kit,48T/96T
6023 人12羥二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA Kit,48T/96T
6024 人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA Kit,48T/96T
6025 小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA Kit,48T/96T
6026 人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA Kit,48T/96T
6027 人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA Kit,48T/96T
6028 人高密度脂蛋白(HDL)ELISA Kit,48T/96T
6029 人N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*ELISA Kit,48T/96T
6030 小鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*
6031 大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*
6032 人低密度脂蛋白受體(LDLR)ELISA Kit,48T/96T
6033 人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)ELISA Kit,48T/96T
6034 人低密度脂蛋白受體相關蛋白6(LRP-6)ELISA Kit,48T/96T
6035 人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)ELISA Kit,48T/96T
6036 人高密度脂蛋白*(HDL-C)ELISA Kit,48T/96T
6037 人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad)ELISA Kit,48T/96T
6038 人白細胞分化抗原4(CD4)ELISA Kit,48T/96T
6039 人α1抗胰*(AACT)ELISA Kit,48T/96T
6040 人γ肽(Pγ)ELISA Kit,48T/96T
6041 人α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA Kit,48T/96T
6042 人α乳清蛋白(α-La)ELISA Kit,48T/96T
6043 人β2糖蛋白(β2-GP)ELISA Kit,48T/96T
6044 人淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA Kit,48T/96T
6045 人β連環蛋白/聯蛋白(β-Cat)ELISA Kit,48T/96T
6046 牛β羥丁酸(βOHB)ELISA Kit,兔子透明質酸(HA)ELISA試劑盒48T/96T
6047 人β羥丁酸(β-OHB)ELISA Kit,48T/96T
6048 大鼠β羥丁酸(βOHB)ELISA Kit,48T/96T
6049 人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA Kit,48T/96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5兔子透明質酸(HA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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