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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-14 18:03:26瀏覽次數(shù):182次
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兔子腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
兔子腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
6601 人*蛋白酶(PRSS)ELISA Kit,48T/96T
6602 人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA Kit,48T/96T
6603 人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA Kit,48T/96T
6604 人未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA Kit,48T/96T
6605 人抗糖脂抗體(glycolipid)ELISA Kit,48T/96T
6606 人甘露糖受體(MR)ELISA Kit,48T/96T
6607 人甘露糖(Mannose)ELISA Kit,48T/96T
6608 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA Kit,48T/96T
6609 人肽聚糖(PG)ELISA Kit,48T/96T
6610 人協(xié)同刺激分子受體(CMR)ELISA Kit,48T/96T
6611 人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA Kit,48T/96T
6612 人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA Kit,48T/96T
6613 人脫氧尿三磷酸(DUTP)ELISA Kit,48T/96T
6614 人重組激活基因1(RAG-1)ELISA Kit,48T/96T
6615 人重組激活基因2(RAG-2)ELISA Kit,48T/96T
6616 人DNA結(jié)合蛋白(DBP)ELISA Kit,48T/96T
6617 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)ELISA Kit,48T/96T
6618 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B)ELISA Kit,48T/96T
6619 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA Kit,48T/96T
6620 人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA Kit,48T/96T
6621 人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA Kit,48T/96T
6622 人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA Kit,48T/96T
6623 人淋巴毒素α(LTA)ELISA Kit,48T/96T
6624 人淋巴毒素β(LTB)ELISA Kit,48T/96T
6625 人類白細胞抗原A(HLA-A)ELISA Kit,48T/96T
6626 人類白細胞抗原E(HLA-E)ELISA Kit,48T/96T
6627 人類白細胞抗原C(HLA-C)ELISA Kit,48T/96T
6628 人干擾素調(diào)節(jié)因子(IRF)ELISA Kit,48T/96T
6629 人糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA Kit,48T/96T
6630 人錨蛋白(ankyrin)ELISA Kit,48T/96T
6631 人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)ELISA Kit,48T/96T
6632 人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA Kit,48T/96T
6633 人ω干擾素(IFN-ω)ELISA Kit,48T/96T
6634 人粒細胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA Kit,48T/96T
6635 人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA Kit,48T/96T
6636 人淋巴細胞功能相關(guān)抗原1(LFA-1/CD11a+CD18)ELISA Kit,48T/96T
6637 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA Kit,48T/96T
6638 人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA Kit,48T/96T
6639 人二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA Kit,48T/96T
6640 人淋巴細胞功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)ELISA Kit,48T/96T
6641 人鳥苷酸交換因子(GEF)ELISA Kit,48T/96T
6642 *G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA Kit,48T/96T
6643 *G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA Kit,48T/96T
6644 *G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA Kit,48T/96T
6645 *E Fc段受體Ⅰ(FcεRⅠ)ELISA Kit,48T/96T
6646 *E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA Kit,48T/96T
6647 *A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA Kit,48T/96T
6648 人巨噬細胞活化因子(MAF)ELISA Kit,48T/96T
6649 人T細胞生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA Kit,兔子腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒48T/96T
6650 人β2整合素(integrin β2/CD11+CD18)ELISA Kit,48T/96T
6651 人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA Kit,48T/96T
6652 人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA Kit,48T/96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5 兔子腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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