兔子堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在兔子堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

7092 人環(huán)胞霉素A(CSA)ELISA Kit Human Cyclosporin A ELISA Kit 96T/48T
7093 人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC) Human LDL-IC ELISA Kit 96T/48T
7094 人熱休克蛋白60(Hsp60)ELISA試劑盒 Human heat shock protein 60 ELISA Kit 96T/48T
7095 人sCD86（sCD86）ELISA試劑盒 Human sCD86 ELISA Kit 96T/48T
7096 人胰淀素(Amylin) Human Amylin ELISA Kit 96T/48T
7097 人分泌型IgA(sIgA) Human secretory IgA ELISA Kit 96T/48T
7098 人胰島素原（PI）ELISA試劑盒 Human Proinsulin ELISA Kit 96T/48T
7099 人抗心肌抗體IgM(HRAb IgM) Human HRAb IgM ELISA Kit 96T/48T
7100 人抗心肌抗體IgG(HRAb IgG) Human HRAb IgG ELISA Kit 96T/48T
7101 人抗心肌抗體(CMA) Human anticardiacmuscle antibody ELISA Kit 96T/48T
7102 人碳酸酐酶(CA) Human carbonic anhydrase ELISA Kit 96T/48T
7103 人β血小板球蛋白(β-TG)ELISA試劑盒 Human β-Thromboglobulin ELISA Kit 96T/48T
7104 *脫羧酶抗體 96T/48T
7105 抗胰島素自體抗體 96T/48T
7106 抗胰島細(xì)胞抗體 96T/48T
7107 核糖體、P抗體、IgG/M/A 96T/48T
7108 組蛋白 96T/48T
7109 人甲狀腺球蛋白(TG)  Human Thyroglobulin ELISA Kit 96T/48T
7110 *IgE ELISA Kit human IgE ELISA Kit 96T/48T
7111 免疫球蛋白IgG IgG 96T/48T
7112 免疫球蛋白IgA IgA 96T/48T
7113 抗角蛋白抗體(KeRatin, AKA) Kit KeRatin, AKA 96T/48T
7114 腎小球基底膜抗體(GBM) Kit GBM 96T/48T
7115 人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(甲醛固定)（pANCA） Human pANCA ELISA Kit 96T/48T
7116 抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體cANCA(乙醇固定) Kit cANCA 96T/48T
7117 人血管緊張素原（aGT） Human angiotensinogen ELISA Kit 96T/48T
7118 人血管緊張素I（Ang I） Human angiotensionⅠELISA Kit 96T/48T
7119 人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒 Human Follistatin ELISA Kit 96T/48T
7120 人甲狀腺素抗體(Thyroid Ab)ELISA試劑盒 Human Thyroid Ab ELISA Kit 96T/48T
7121 人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 Human catecholamine ELISA Kit 96T/48T
7122 人胱抑素C(Cys C)ELISA試劑盒 Human Cystatin C ELISA Kit 96T/48T
7123 人乙酰*受體抗體（AChRab）ELISA試劑盒 Human acetylcholine receptor antibody ELISA Kit 96T/48T
7124 人5-羥色氨（5-HT）ELISA試劑盒 Human Serotonin 5-Hydroxytryptamine ELISA Kit 96T/48T
7125 人甲狀腺過(guò)氧化物酶（TPO） Human Thyroid-Peroxidase ELISA Kit 96T/48T
7126 人抑制素A（INH A） Human Inhibin A ELISA Kit 96T/48T
7127 人性激素結(jié)合球蛋白（SHBG） Human SHBG ELISA Kit 96T/48T
7128 人脫氫表雄酮-S-7（DHEA-S-7） Human DHEA-S-7 ELISA Kit 96T/48T
7129 人脫氫表雄酮（DHEA） Human DHEA ELISA Kit 96T/48T
7130 人*（SS） Human Somatostatin ELISA Kit 96T/48T
7131 人生長(zhǎng)激素釋放多肽（ghrelin）ELISA試劑盒 Human ghrelin ELISA Kit 96T/48T
7132 人促甲狀腺素釋放激素(TRH) Human thyrotropin-releasing hormone ELISA Kit 96T/48T
7133 人血栓素(TXB2) Thromboxane B2 96T/48T
7134 人雙氫睪酮(DHT) Human dihy-drotestosterone Elisa kit 96T/48T
7135 人促生長(zhǎng)激素釋放激素(GRH) Human GRH ELISA Kit 96T/48T
7136 人雌激素（estrogen） Human estrogen ELISA Kit 96T/48T
7137 人孕激素（Progesterone） Human Progesterone ELISA kit 96T/48T
7138 人促甲狀腺素(TSH) Human TSH ELISA Kit 96T/48T
7139 人*(Cortisol)ELISA Kit Human Cortisol ELISA Kit 96T/48T
7140 人雌二醇(E2) Human Estradiol ELISA Kit 96T/48T
7141 人三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA Kit Human T3 ELISA Kit 96T/48T
7142 人甲狀腺素(T4) Human T4 ELISA Kit 96T/48T
7143 人游離甲狀腺素(Free-T4)兔子堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)ELISA試劑盒 Human Free-T4 ELISA Kit 96T/48T
7144 游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3) Human Free-T3 ELISA Kit 96T/48T
7145 人新生甲狀腺素(NN-T4) Human NN-T4 ELISA Kit 96T/48T
7146 人胰島素(Insulin)ELISA Kit Human Insulin ELISA Kit 96T/48T
7147 人C-肽(C-Peptide) Human C-Peptide ELISA Kit 96T/48T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5 兔子堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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