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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2016-12-26 19:02:17瀏覽次數(shù):189次
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兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
7148 人促腎上腺激素皮質激素(ATH) Human ATH ELISA Kit 96T/48T
7149 人絨毛*(HCG) Human HCG ELISA Kit 96T/48T
7150 人絨毛*β(β-HCG) Human β-HCG ELISA Kit 96T/48T
7151 人促乳素(Prolactin) Human Prolactin ELISA Kit 96T/48T
7152 *(LH) Human LH ELISA Kit 96T/48T
7153 促卵泡生長激素(FSH) Human FSH ELISA Kit 96T/48T
7154 全段甲狀腺素(Intact PTH) Human Intact PTH ELISA Kit 96T/48T
7155 人妊娠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 Human pregnancy associated plasma protein-A ELISA Kit 96T/48T
7156 人抗子宮內(nèi)膜抗體(AEA) Human AEA(IgG,M) ELISA Kit 96T/48T
7157 人白細胞抗原B27(HLA-B27) Human leucocyte antigen-B27 ELISA Kit 96T/48T
7158 人神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白(GFAP) Human glial fibrillary acidic protein ELISA Kit 96T/48T
7159 人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b) ELISA試劑盒 Human tartRate-resistant acid phosphatase orm 5b ELISA Kit 96T/48T
7160 人骨原交聯(lián)(CrossLaps) Human CrossLaps ELISA Kit 96T/48T
7161 人I型腺原蛋白C末端前肽(CICP) Human CICP ELISA Kit 96T/48T
7162 大鼠脫氧吡啶吩(DPD) Rat DPD ELISA Kit 96T/48T
7163 人脫氧吡啶吩(DPD) Human DPD ELISA Kit 96T/48T
7164 人吡啶吩(PyriLinks) Human PyriLinks ELISA Kit 96T/48T
7165 人骨橋素(Osteocalcin) Human Osteocalcin ELISA Kit 96T/48T
7166 人P物質受體(SP-R) Human substance P receptor ELISA Kit 96T/48T
7167 人降鈣素基因相關肽(CGRP) Human calcitonin gene related peptide ELISA Kit 96T/48T
7168 人橫紋肌輔肌動蛋白α (Actinin α ) ELISA試劑盒 Human Actinin α ELISA Kit 96T/48T
7169 人骨成型蛋白質7(BMP-7) Human Bone morphogenetic protein 7 ELISA Kit 96T/48T
7170 超級鮭魚(U.S. Salmon. CT.) U.S. Salmon. CT. ELISA Kit 96T/48T
7171 人*受體(VD Receptor) Human Vitamin D Receptor ELISA Kit 96T/48T
7172 人全段甲狀旁腺激素(I-PTH) Human I-PTH ELISA Kit 96T/48T
7173 人骨特異性堿性磷酸酶(ALP-B) Human Bone-specific Alkphase-B ELISA Kit 96T/48T
7174 人降鈣素(CT) Human CT ELISA Kit 96T/48T
7175 人骨鈣素(OC) Human OC ELISA Kit 96T/48T
7176 人可溶性破骨細胞異化因子(sPANKL) Human sPANKL ELISA Kit 96T/48T
7177 人25-羥基*(25-HVD) Human 25-HVD ELISA Kit 96T/48T
7178 人1,25-二羥基*3(1,25(OH)2D3)ELISA Kit Human 1,25-dihydroxyvitamin D3 ELISA Kit 96T/48T
7179 大鼠apelin-12(apelin-12)ELISA Kit Rat apelin-12 ELISA Kit 96T/48T
7180 人apelin-12(apelin-12) Human apelin-12 ELISA Kit 96T/48T
7181 人超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA Kit Human High sensitivity C-reactive protein ELISA Kit 96T/48T
7182 人15-脂加氧酶(15-LO) Human 15-lipoxygenase ELISA Kit 96T/48T
7183 人肌鈣蛋白-I(Tn-I)ELISA Kit Human Troponin I ELISA Kit 96T/48T
7184 人血清淀粉樣蛋白A(SAA) Human Serum amyloid A ELISA Kit 96T/48T
7185 人補體1q(C1q) Human C1q ELISA Kit 96T/48T
7186 人補體片斷C4a(C4a) Human C4a ELISA Kit 96T/48T
7187 人補體片斷C5a(C5a) Human C5a ELISA Kit 96T/48T
7188 人補體片斷C3a(C3a) Human C3a ELISA Kit 96T/48T
7189 人糖原磷酸化酶同工酶II(GPII) Human Glycogen phosphorylase II ELISA Kit 96T/48T
7190 人糖原磷酸化酶同工酶MM(GPMM) Human Glycogen phosphorylase MM ELISA Kit 96T/48T
7191 人糖原磷酸化酶同工酶BB(GPBB)ELISA試劑盒 Human Glycogen phosphorylase BB ELISA Kit 96T/48T
7192 人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒 Human cardiotrophln-l ELISA Kit 96T/48T
7193 人脂蛋白(Lpa) Human Lpa ELISA Kit 96T/48T
7194 人血管性血友病因子(VWF)ELISA試劑盒 Human VWF ELISA Kit 96T/48T
7195 大鼠纖溶酶-抗纖溶酶復合物檢測(PAP) Rat PAP ELISA Kit 96T/48T
7196 人纖溶酶-抗纖溶酶復合物檢測(PAP) Human PAP ELISA Kit 96T/48T
7197 人*-抗*復合物(TAT) Human TAT ELISA Kit 96T/48T
7198 人抗*受體(ATR) Human anti-thrombin receptor ELISA Kit 96T/48T
7199 人*受體(TR) Human thrombin receptor ELISA Kit 96T/48T
7200 人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA試劑盒 Human lipoprotein-associated phospholipase A2 ELISA Kit 96T/48T
7201 腦鈉肽 Nt-proBNP兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒 96T/48T
7202 人心鈉肽Pro-ANP(1-98) Human Pro-ANP(1-98) ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5 兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質控、室間質評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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