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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
7600 大鼠C-肽(C-Peptide) Rat C-Peptide ELISA Kit 96T/48T
7601 大鼠促腎上腺激素皮質激素(Rat ATH) Rat ATH ELISA Kit 96T/48T
7602 大鼠絨毛*(HCG) Rat HCG ELISA Kit 96T/48T
7603 大鼠促黃體激素(LH) Rat LH ELISA Kit 96T/48T
7604 大鼠促卵泡生長激素(Rat FSH) Rat FSH ELISA Kit 96T/48T
7605 大鼠促乳素(Prolactin) Rat Prolactin ELISA Kit 96T/48T
7606 大鼠*(AZT) Rat AZT ELISA Kit 96T/48T
7607 大鼠高靈敏度*(U-TSH) Rat U-TSH ELISA Kit 96T/48T
7608 大鼠高敏甲狀腺素(T4) Rat T4 ELISA Kit 96T/48T
7609 大鼠*脫羧酶自身抗體(GAD) Rat GAD ELISA Kit 96T/48T
7610 大鼠多巴胺(dopamine) Rat dopamine ELISA Kit 96T/48T
7611 大鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP) Rat PaRathyroid Hormone-Like Related Protein ELISA Kit 96T/48T
7612 大鼠心磷脂抗體Cardiolipin IgG(ACAIgG) Rat Cardiolipin IgG (ACAIgG) ELISA Kit 96T/48T
7613 大鼠心磷脂抗體Cardiolipin IgM (ACAIgM) Rat Cardiolipin IgM (ACAIgM) 96T/48T
7614 大鼠心磷脂抗體Cardiolipin IgA(ACAIgA) Rat Cardiolipin IgA (ACAIgA)) Elisa kit 96T/48T
7615 大鼠干擾素α(IFNα)ELISA Kit Rat Interferon α ELISA Kit 96T/48T
7616 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測 Rat BSA ELISA Kit 96T/48T
7617 大鼠*II(FII) Rat FII ELISA Kit 96T/48T
7618 大鼠內毒素(endotoxin)ELISA Kit Rat endotoxin ELISA Kit 96T/48T
7619 大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA Kit Rat PPAR-γ ELISA Kit 96T/48T
7620 大鼠環胞霉素A(CSA) Rat Cyclosporin A ELISA Kit 96T/48T
7621 大鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP) Rat High sensitivity C-Reactive Protein ELISA 96T/48T
7622 大鼠β2糖蛋白1抗體Ig(A,G,M)(β2-GP1)ELISA Kit Rat β2-GP1 Ig(A,G,M) ELISA Kit 96T/48T
7623 大鼠抗子宮內膜抗體(AEA)ELISA Kit Rat AEA(IgG,M)ELISA Kit 96T/48T
7624 大鼠白細胞抗原B27(HLA-B27) Rat leucocyte antigen-B27 ELISA Kit 96T/48T
7625 大鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC) Rat LDL-IC ELISA Kit 96T/48T
7626 大鼠神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA Kit Rat glial fibrillary acidic protein ELISA Kit 96T/48T
7627 大鼠抗中性粒細胞胞漿抗體(甲醛固定)(pANCA) Rat pANCA ELISA Kit 96T/48T
7628 大鼠15-脂加氧酶(15-LO)ELISA試劑盒 Rat 15-lipoxygenase ELISA Kit 96T/48T
7629 大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTnI)ELISA試劑盒 Rat Troponin I ELISA Kit 96T/48T
7630 大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA) Rat Serum amyloid A ELISA Kit 96T/48T
7631 大鼠結合珠蛋白(Hpt) Rat Haptoglobin ELISA KIT 96T/48T
7632 大鼠α1-酸性糖蛋白(α1-AGP) Rat α1-Acid glycoprotein ELISA Kit 96T/48T
7633 大鼠內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3) Rat Endothelial nitric oxide synthase 3 ELISA Kit 96T/48T
7634 大鼠*酯轉移蛋白(CETP) Rat cholesterolestertransferprotein ELISA Kit 96T/48T
7635 大鼠血管緊張素原(aGT) Rat angiotensinogen ELISA Kit 96T/48T
7636 大鼠熱休克蛋白60(Hsp60) Rat heat shock protein 60 ELISA Kit 96T/48T
7637 大鼠丙二醛(MDA) Rat malondialchehyche ELISA Kit 96T/48T
7638 大鼠超氧化物歧化酶(SOD) Rat SOD ELISA Kit 96T/48T
7639 大鼠腫瘤排斥性抗原gp96(gp96) Rat Glycoprotein96 ELISA Kit 96T/48T
7640 大鼠總溶血補體(CH50) Rat total hemolytic complement ELISA Kit 96T/48T
7641 大鼠sCD86(sCD86)ELISA試劑盒 Rat sCD86 ELISA Kit 96T/48T
7642 大鼠低氧誘導因子-1α(HIF-1α) Rat HIF-1α ELISA Kit 96T/48T
7643 大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒 Rat Amylin ELISA Kit 96T/48T
7644 大鼠白三烯C4(LTC4) Rat LTC4 ELISA Kit 96T/48T
7645 大鼠*(Cytochrome C)ELISA試劑盒 Rat Cytochrome C ELISA Kit 96T/48T
7646 大鼠血管緊張素I(Ang I) Rat angiotension I ELISA Kit 96T/48T
7647 大鼠黑色素細胞抗體(melanocyte) Rat anti-melanocyte ELISA Kit 96T/48T
7648 大鼠二肽基肽酶IV(DPP4)ELISA試劑盒 Rat DPP4 ELISA Kit 96T/48T
7649 大鼠補體片斷C4a(C4a) Rat C4a ELISA Kit 96T/48T
7650 大鼠補體片斷C5a(C5a) Rat C5a ELISA Kit 96T/48T
7651 大鼠補體片斷C3a(C3a)兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 Rat C3a ELISA Kit 96T/48T
7652 大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒 Rat Follistatin ELISA Kit 96T/48T
7653 大鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD) Rat Histone Deacetylase ELISA Kit 96T/48T
7654 大鼠E選擇素(E-Selectin)ELISA試劑盒 Rat E-Selectin ELISA kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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