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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
7656 大鼠增殖細胞抗原(PCNA) Rat PCNA ELISA Kit 96T/48T
7657 大鼠脂蛋白脂酶(LPL) Rat Lamina Propria Lymphocyte ELISA Kit 96T/48T
7658 大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b) Rat tartRate-resistant acid phosphatase orm 5b ELISA Kit 96T/48T
7659 大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 Rat Glucose-dependent insulin-releasing polypeptide ELISA Kit 96T/48T
7660 大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GPII) Rat Glycogen phosphorylase II ELISA Kit 96T/48T
7661 大鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GPMM) Rat Glycogen phosphorylase MM ELISA Kit 96T/48T
7662 大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GPBB) Rat Glycogen phosphorylase BB ELISA Kit 96T/48T
7663 大鼠甲狀腺素抗體(Thyroid Ab) Rat Thyroid Ab ELISA Kit 96T/48T
7664 大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb) Rat TRAb ELISA Kit 96T/48T
7665 大鼠兒茶酚胺(CA) Rat catecholamine ELISA Kit 96T/48T
7666 大鼠白介素23(IL-23) ELISA試劑盒 Rat Interleukin23 ELISA Kit 96T/48T
7667 大鼠心肌營養素1(CT-1) Rat cardiotrophln-l ELISA Kit 96T/48T
7668 大鼠alpha-Fodrin抗體IgG/IgA Rat anti-alpha-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit 96T/48T
7669 大鼠脂蛋白(Lpa) Rat Lpa ELISA Kit 96T/48T
7670 大鼠*VIII相關抗原(VIII-Ag) Rat VIII-Ag ELISA Kit 96T/48T
7671 大鼠血管性血友病因子(VWF) Rat VWF ELISA Kit 96T/48T
7672 大鼠*-抗*復合物(TAT) Rat TAT ELISA Kit 96T/48T
7673 大鼠抗*受體(ATR) Rat anti-thrombin receptor ELISA Kit 96T/48T
7674 大鼠*受體(TR) Rat thrombin receptor ELISA Kit 96T/48T
7675 大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTNI)ELISA試劑盒 Rat cardiac troponin I ELISA Kit 96T/48T
7676 大鼠磷脂酰肌醇三羥基激酶(PI3K) Rat Phosphoinositide-3 kinase ELISA Kit 96T/48T
7677 大鼠蛋白激酶B(PKB) Rat protein kinase B ELISA Kit 96T/48T
7678 大鼠分泌型IgA(sIgA) Rat secretory IgA ELISA Kit 96T/48T
7679 大鼠血紅素氧合酶2(HO-2) Rat heme oxygenase-2 ELISA Kit 96T/48T
7680 大鼠骨原交聯(CrossLaps) Rat CrossLaps ELISA Kit 96T/48T
7681 大鼠I型腺原蛋白C末端前肽(CICP) Rat CICP ELISA Kit 96T/48T
7682 大鼠吡啶吩(PyriLinks) Rat PyriLinks ELISA Kit 96T/48T
7683 大鼠骨橋素(Osteocalcin) Rat Osteocalcin ELISA Kit 96T/48T
7684 大鼠骨特異性堿性磷酸酶(AlP-B)ELISA試劑盒 Rat Bone-specific Alkphase-B ELISA Kit 96T/48T
7685 大鼠轉鐵蛋白受體(TFR) Rat transferrin receptor ELISA Kit 96T/48T
7686 大鼠胱抑素C(Cys C) Rat Cystatin C ELISA Kit 96T/48T
7687 大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK) Rat Pyruvate Kinase M2 ELISA Kit 96T/48T
7688 大鼠乙酰*受體抗體(AChRab) Rat acetylcholine receptor antibody ELISA Kit 96T/48T
7689 大鼠γ氨基丁酸(GABA) Rat Gamma-aminobutyric acid ELISA Kit 96T/48T
7690 大鼠5-羥色氨(5-HT) Rat Serotonin 5-Hydroxytryptamine ELISA Kit 96T/48T
7691 大鼠P物質受體(SP-R) Rat substance P receptor ELISA Kit 96T/48T
7692 大鼠P物質(SP) Rat Substance P ELISA Kit 96T/48T
7693 大鼠血管活性腸肽(VIP) Rat Vasoactive Intestinal Peptide ELISA Kit 96T/48T
7694 大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒 Rat Thyroid-Peroxidase ELISA Kit 96T/48T
7695 大鼠α-L-巖藻糖苷酶(AFU) Rat α-L-fucosidasea useful ELISA Kit 96T/48T
7696 大鼠胰島素原(PI) Rat Proinsulin ELISA Kit 96T/48T
7697 大鼠抗心肌抗體IgM(HRAb IgM) Rat HRAb IgM ELISA Kit 96T/48T
7698 大鼠抗心肌抗體IgG(HRAb IgG) Rat HRAb IgG ELISA Kit 96T/48T
7699 大鼠一氧化氮合成酶(NOS) Rat nitric oxide synthase ELISA KIT 96T/48T
7700 大鼠誘導型一氧化氮合成酶(iNOS) Rat inducible nitric oxide synthase ELISA KIT 96T/48T
7701 大鼠內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 Rat Endothelial nitric oxide synthase ELISA Kit 96T/48T
7702 大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA Kit Rat lipoprotein-associated phospholipase A2 ELISA Kit 96T/48T
7703 大鼠熱休克蛋白90(HSP90)ELISA試劑盒 Rat Heat Shock Protein 90 ELISA Kit 96T/48T
7704 大鼠熱休克蛋白70(HSP70) Rat Heat Shock Protein 70 ELISA Kit 96T/48T
7705 大鼠熱休克蛋白40(HSP40) Rat Heat Shock Protein 40 ELISA Kit 96T/48T
7706 大鼠熱休克蛋白20(HSP20) Rat Heat Shock Protein 20 ELISA Kit 96T/48T
7707 大鼠β淀粉樣蛋白1-40兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒(Aβ1-40) Rat Amyloid-β-Protein(1-40) ELISA Kit 96T/48T
7708 大鼠細胞周期素D3(Cyclin D3) Rat Cyclin D3 ELISA Kit 96T/48T
7709 大鼠細胞周期素D2(Cyclin D2) Rat Cyclin D2 ELISA Kit 96T/48T
7710 大鼠細胞周期素D1(Cyclin D1) Rat Cyclin D1 ELISA Kit 96T/48T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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