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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2016-12-27 00:51:26瀏覽次數(shù):491次
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兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
8555 腺苷酸環(huán)化酶1(ADCY1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adenylate Cyclase 1, Brain (ADCY1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8556 腺苷酸環(huán)化酶關(guān)聯(lián)蛋白1(CAP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adenylyl Cyclase Associated Protein 1 (CAP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8557 脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adipose Differentiation Related Protein (ADRP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8558 通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡB(GTF2B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for General Transcription Factor IIB (GTF2B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8559 巨噬細(xì)胞表達(dá)基因1蛋白(MPG1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Macrophage Expressed Protein 1 (MPG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8560 抗PL12抗體(Anti-PL12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-PL12 Antibody 48T/96T Homo sapiens (Human)
8561 抗PL7抗體(Anti-PL7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-PL7 Antibody 48T/96T Homo sapiens (Human)
8562 不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRPA2B1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein A2/B1 (HNRPA2B1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8563 抗神經(jīng)元核抗體2型(ANNA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Neuronal Nuclear Antibody 2 (ANNA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8564 抗Sa抗體(Anti-Sa)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Sa Antibody 48T/96T Homo sapiens (Human)
8565 Sp100核抗原(Sp100)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sp100 Nuclear Antigen (Sp100) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8566 抗白蛋白抗體(AAA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Albumin Antibody (AAA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8567 尾加壓素2受體(UTS2R)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Urotensin 2 Receptor (UTS2R) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8568 回腸脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 6, Ileal (FABP6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8569 抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(Anti-EBMZ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Epidermal Basement Membrane Zone Antibody (Anti-EBMZ) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8570 蛋白激酶Cγ(PKCγ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Kinase C Gamma (PKCg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8571 沉默調(diào)節(jié)蛋白2(SIRT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sirtuin 2 (SIRT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8572 肌原纖蛋白3(FBN3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibrillin 3 (FBN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8573 銅藍(lán)蛋白(CP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ceruloplasmin (CP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8574 半*蛋白酶抑制劑3(CST3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cystatin 3 (CST3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8575 半*蛋白酶抑制劑3(CST3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cystatin 3 (CST3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8576 半*蛋白酶抑制劑3(CST3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cystatin 3 (CST3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8577 C組著色性干皮病偶聯(lián)因子(XPC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Xeroderma Pigmentosum, Complementation Group C (XPC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8578 C組著色性干皮病偶聯(lián)因子(XPC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Xeroderma Pigmentosum, Complementation Group C (XPC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8579 骨橋素(OPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Osteopontin (OPN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8580 骨橋素(OPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Osteopontin (OPN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8581 骨橋素(OPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Osteopontin (OPN) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
8582 骨橋素(OPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Osteopontin (OPN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8583 α-骨膠原交聯(lián)(αCTx)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Alpha-Crosslaps (aCTx) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8584 α-骨膠原交聯(lián)(αCTx)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Alpha-Crosslaps (aCTx) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8585 α-骨膠原交聯(lián)(αCTx)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Alpha-Crosslaps (aCTx) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8586 脫氧吡啶酚(DPD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Deoxypyridinoline (DPD) 48T/96T General
8587 Ⅲ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅢ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cross Linked C-opeptide Of Type III Collagen (CTXIII) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8588 Ⅲ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅢ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cross Linked C-opeptide Of Type III Collagen (CTXIII) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8589 Ⅲ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅢ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cross Linked C-opeptide Of Type III Collagen (CTXIII) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8590 β-骨膠原交聯(lián)(βCTx)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Beta-Crosslaps (bCTx) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8591 β-骨膠原交聯(lián)(βCTx)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Beta-Crosslaps (bCTx) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8592 β-骨膠原交聯(lián)(βCTx)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Beta-Crosslaps (bCTx) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8593 血紅素氧合酶2(HO2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Heme Oxygenase 2, Decycling (HO2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8594 血紅素氧合酶2(HO2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Heme Oxygenase 2, Decycling (HO2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8595 血紅素氧合酶2(HO2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Heme Oxygenase 2, Decycling (HO2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8596 分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Secretory Immunoglobulin A (sIgA) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8597 分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Secretory Immunoglobulin A (sIgA) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8598 蛋白激酶Bγ(PKBγ)檢測(cè)試劑盒兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Kinase B Gamma (PKBg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8599 蛋白激酶Bγ(PKBγ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Kinase B Gamma (PKBg) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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