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上海紀寧酶聯科技有限公司
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兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
8903 中性粒細胞彈性蛋白酶(ELA2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Elastase 2, Neutrophil (ELA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8904 胱天蛋白酶9(CASP9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Caspase 9 (CASP9) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8905 BH3相互作用域死亡激動劑(Bid)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for BH3 Interacting Domain Death Agonist (Bid) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8906 BH3相互作用域死亡激動劑(Bid)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for BH3 Interacting Domain Death Agonist (Bid) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8907 BH3相互作用域死亡激動劑(Bid)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for BH3 Interacting Domain Death Agonist (Bid) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8908 胱天蛋白酶5(CASP5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Caspase 5 (CASP5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8909 趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8910 趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8911 趨化因子C-X-C-基元配體16(CXCL16)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8912 糖原合酶激酶3α(GSK3α)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8913 糖原合酶激酶3α(GSK3α)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8914 糖原合酶激酶3α(GSK3α)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8915 B-細胞淋巴瘤因子2(Bcl2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
8916 丙酮酸脫氫酶α(PDHα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8917 丙酮酸脫氫酶α(PDHα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8918 己糖激酶1(HK1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8919 己糖激酶1(HK1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8920 己糖激酶1(HK1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hexokinase 1 (HK1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8921 Ⅳ型膠原(COL4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Type IV (COL4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8922 中期因子(MK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Midkine (MK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8923 胰島素樣生長因子1(IGF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
8924 同型半*(HA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Homocysteic Acid (HA) 48T/96T General
8925 細胞間粘附分子1(ICAM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
8926 *S轉移酶α1(GSTα1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8927 *S轉移酶α1(GSTα1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8928 *S轉移酶α5(GSTα5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 5 (GSTa5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8929 C-型鈉尿肽(CNP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for C-Type Natriuretic Peptide (CNP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8930 氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hexosaminidase B Beta (HEXb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8931 氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hexosaminidase B Beta (HEXb) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8932 氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hexosaminidase B Beta (HEXb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8933 補體因子H(CFH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Factor H (CFH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8934 補體因子H(CFH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Factor H (CFH) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8935 補體因子H(CFH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Factor H (CFH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8936 *原激活肽(TAP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Trypsinogen Activation Peptide (TAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8937 *原激活肽(TAP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Trypsinogen Activation Peptide (TAP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8938 *原激活肽(TAP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Trypsinogen Activation Peptide (TAP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8939 成纖維細胞生長因子7(FGF7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 7 (FGF7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8940 內脂素(VF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Visfatin (VF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8941 內脂素(VF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Visfatin (VF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
8942 內脂素(VF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Visfatin (VF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
8943 11-去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 11-Dehydrothromboxane B2兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 (11-DH-TXB2) 48T/96T General
8944 12-羥基二十烷四烯酸(12-HETE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 12-Hydroxyeicosatetraenoic Acid (12-HETE) 48T/96T General
8945 雌酮(E1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Estrone (E1) 48T/96T General
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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