兔子*Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在兔子*Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發，提高試驗質量。

8990 促胰液素(SCT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secretin (SCT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8991 促胰液素受體(SCTR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secretin Receptor (SCTR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8992 ⅡD組磷脂酶A2(PLA2G2D)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IID (PLA2G2D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8993 S100鈣結合蛋白A13(S100A13)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A13 (S100A13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8994 通用轉錄因子ⅡH肽1(GTF2H1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for General Transcription Factor IIH, Polypeptide 1 (GTF2H1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8995 S100鈣結合蛋白A12(S100A12)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A12 (S100A12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8996 70kDa熱休克蛋白1A(HSPA1A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 1A (HSPA1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8997 70kDa熱休克蛋白9(HSPA9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 9 (HSPA9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8998 甘丙肽(GAL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Galanin (GAL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
8999 線粒體超氧化物歧化酶(SOD2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial (SOD2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9000 腸堿性磷酸酶(ALPI)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Intestinal (ALPI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9001 早期生長應答因子4(EGR4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Early Growth Response Protein 4 (EGR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9002 35kDa核孔蛋白(NUP35)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleoporin 35kDa (NUP35) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9003 37kDa核孔蛋白(NUP37)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleoporin 37kDa (NUP37) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9004 *S轉移酶κ1(GSTκ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Kappa 1 (GSTk1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9005 *S轉移酶π1(GSTπ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Pi (GSTp) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9006 肝腎骨堿性磷酸酶(ALPL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Liver/Bone/Kidney (ALPL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9007 骨涎蛋白(BSP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bone Sialoprotein (BSP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9008 *ⅩⅢA1肽(F13A1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide (F13A1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9009 腦指蛋白(BFP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Brain Finger Protein (BFP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9010 核基質蛋白4(NMP4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nuclear Matrix Protein 4 (NMP4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9011 胎兒腎鈣黏蛋白(KCAD)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cadherin, Fetal Kidney (KCAD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9012 花生四烯酸(AA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Arachidonic Acid (AA) 48T/96T General
9013 低密度脂蛋白(LDL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Low Density Lipoprotein (LDL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9014 肌細胞生成素(MYOG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Myogenin (MYOG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9015 85kDa核孔蛋白(NUP85)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleoporin 85kDa (NUP85) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9016 107kDa核孔蛋白(NUP107)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleoporin 107kDa (NUP107) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9017 中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neutrophil Alkaline Phosphatase (NAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9018 甲胎蛋白異質體1(αFPL1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein Lens Culinaris Agglutinin 1 (aFPL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9019 甲胎蛋白異質體2(αFPL2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein Lens Culinaris Agglutinin 2 (aFPL2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9020 成纖維細胞生長因子23(FGF23)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9021 CCAAT增強子結合蛋白γ(CEBPγ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for CCAAT/Enhancer Binding Protein Gamma (CEBPg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9022 補體1q(C1q)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement 1q (C1q) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9023 *Ⅴ(F5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Coagulation Factor V (F5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9024 *Ⅴ(F5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Coagulation Factor V (F5) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9025 *ⅩⅢ(F13)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Coagulation Factor XIII (F13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9026 *ⅩⅢ(F13)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Coagulation Factor XIII (F13) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9027 *Ⅻ(F12)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Coagulation Factor XII (F12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9028 *Ⅻ(F12)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Coagulation Factor XII (F12) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9029 免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
9030 三葉因子2(TFF2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Trefoil Factor 2 (TFF2) 48T/96T Homo sapiens兔子*Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 (Human)
9031 三葉因子2(TFF2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Trefoil Factor 2 (TFF2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5兔子*Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹的工作作風檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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