豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

10207 白血病抑制因子(LIF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Leukemia Inhibitory Factor (LIF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10208 抗SSA/Ro抗體(Anti-Ro)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-SSA/Ro Antibody (Anti-Ro) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10209 抗單鏈DNA抗體(Anti-ssDNA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Single Stranded DNA Antibody (Anti-ssDNA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10210 α-胞襯蛋白(SPTAN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Alpha-Fodrin (SPTAN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10211 嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子2(NCF2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neutrophil Cytosolic Factor 2 (NCF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10212 促甲狀腺素(TSH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Thyroid Stimulating Hormone (TSH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10213 促甲狀腺素(TSH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Thyroid Stimulating Hormone (TSH) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10214 促甲狀腺素(TSH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Thyroid Stimulating Hormone (TSH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10215 抗精子抗體(AsAb)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Sperm Antibody (AsAb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10216 抗子宮內(nèi)膜抗體(Anti-EMAb)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Endometrium Antibody (Anti-EMAb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10217 脂聯(lián)素(ADP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adiponectin (ADP) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10218 腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10219 表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白A(SPA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein A (SPA) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10220 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10221 組胺(HIS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Histamine (HIS) 48T/96T General
10222 內(nèi)皮素1(EDN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
10223 *2(VD2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vitamin D2 (VD2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10224 *3(VD3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vitamin D3 (VD3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10225 *12(VB12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vitamin B12 (VB12) 48T/96T General
10226 速激肽受體2(TACR2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tachykinin Receptor 2 (TACR2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10227 速激肽受體2(TACR2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tachykinin Receptor 2 (TACR2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10228 速激肽受體2(TACR2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tachykinin Receptor 2 (TACR2) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
10229 腎損傷分子1(Kim1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Kidney Injury Molecule 1 (Kim1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10230 腎損傷分子1(Kim1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Kidney Injury Molecule 1 (Kim1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10231 腎損傷分子1(Kim1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Kidney Injury Molecule 1 (Kim1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10232 C-型鈉尿肽(CNP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for C-Type Natriuretic Peptide (CNP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10233 C-型鈉尿肽(CNP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for C-Type Natriuretic Peptide (CNP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10234 *(PP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Pepsin (PP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10235 血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGFBB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor BB (PDGFBB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10236 血小板衍生生長(zhǎng)因子B(PDGFB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor Subunit B (PDGFB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10237 表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein J (SPJ) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10238 50kDa核孔蛋白(NUP50)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleoporin 50kDa (NUP50) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10239 肌球蛋白輕鏈2(MYL2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myosin Light Chain 2, Regulatory, Cardiac (MYL2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10240 抗甲基乙二醛抗體(AMA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Methylglyoxal Antibody (AMA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10241 輔肌動(dòng)蛋白α3(ACTN3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Actinin Alpha 3 (ACTN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10242 肌球蛋白輕鏈1(MYL1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myosin Light Chain 1, Alkali, Fast Skeletal (MYL1) 48T/96T Homo sapiens豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 (Human)
10243 肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myosin Light Chain Kinase (MYLK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10244 白血病抑制因子(LIF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Leukemia Inhibitory Factor (LIF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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