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上海紀寧酶聯科技有限公司
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倉鼠甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
倉鼠甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在倉鼠甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
11106 頂體蛋白(ACR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Acrosin (ACR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11107 精子蛋白17(Sp17)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sperm Protein 17 (Sp17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11108 轉化生長因子β3(TGFβ3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11109 血管內皮生長因子受體2(VEGFR2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2 (VEGFR2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11110 Toll樣受體7(TLR7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 7 (TLR7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11111 Toll樣受體7(TLR7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 7 (TLR7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11112 胰腺再生蛋白Ⅳ(REG4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 4 (REG4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11113 組蛋白乙酰基轉移酶1(HAT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Histone Acetyltransferase 1 (HAT1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11114 核因子κB激酶抑制因子相互作用蛋白(IκBIP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inhibitor Of Nuclear Factor Kappa B Kinase Interacting Protein (IKBIP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11115 單氨氧化酶A(MAOA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Monoamine Oxidase A (MAOA) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11116 白介素17B(IL17B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 17B (IL17B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11117 吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11118 丙酮酸脫氫酶α(PDHα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11119 *S轉移酶α2(GSTα2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 2 (GSTa2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11120 中期因子(MK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Midkine (MK) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11121 胃泌素(GT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Gastrin (GT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11122 CD34分子(CD34)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 34 (CD34) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11123 CD34分子(CD34)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 34 (CD34) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11124 促腎上腺皮質激素(ACTH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adrenocorticotropic Hormone (ACTH) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11125 超氧化物歧化酶1(SOD1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Superoxide Dismutase 1, Soluble (SOD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11126 心鈉肽(ANP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11127 心鈉肽(ANP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11128 心鈉肽(ANP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11129 發動蛋白1(DNM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dynamin 1 (DNM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11130 別孕烯醇酮(AP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Allopregnanolone (AP) 48T/96T General
11131 防御素β1(DEFβ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Defensin Beta 1 (DEFb1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11132 三葉因子3(TFF3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Trefoil Factor 3, Intestinal (TFF3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11133 低密度脂蛋白(LDL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Low Density Lipoprotein (LDL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11134 高密度脂蛋白(HDL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for High Density Lipoprotein (HDL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11135 鈣蛋白酶1(CAPN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calpain 1, Large Subunit (CAPN1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11136 花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Arachidonate-5-Lipoxygenase (ALOX5) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11137 ⅡD組磷脂酶A2(PLA2G2D)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IID (PLA2G2D) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11138 胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Cytosolic (cPLA2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11139 血幼素(HJV)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hemojuvelin (HJV) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11140 轉甲狀腺素蛋白(TTR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transthyretin (TTR) 48T/96T 倉鼠甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒Rattus norvegicus (Rat)
11141 白蛋白(ALB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Albumin (ALB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11142 組蛋白H3(H3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Histone H3 (H3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5倉鼠甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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