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上海紀寧酶聯科技有限公司
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倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
11144 載脂蛋白A4(APOA4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein A4 (APOA4) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11145 載脂蛋白D(APOD)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein D (APOD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11146 補體成分5(C5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Component 5 (C5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11147 血小板反應蛋白解整合素金屬肽酶1(ADAMTS1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 1 (ADAMTS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11148 補體成分8γ(C8γ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Component 8g (C8g) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11149 血小板反應蛋白解整合素金屬肽酶7(ADAMTS7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 7 (ADAMTS7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11150 蛋白S(PROS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein S (PROS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11151 色素上皮衍生因子(PEDF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pigment Epithelium Derived Factor (PEDF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11152 表面活性物質關聯蛋白B(SPB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein B (SPB) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11153 表面活性物質關聯蛋白C(SPC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein C (SPC) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11154 瘦素(LEP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Leptin (LEP) 48T/96T Chicken (Gallus)
11155 基質金屬蛋白酶28(MMP28)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 28 (MMP28) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11156 肌腱蛋白C(TNC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tenascin C (TNC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11157 肌腱蛋白C(TNC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tenascin C (TNC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11158 *ⅩⅢB肽(F13B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Coagulation Factor XIII B Polypeptide (F13B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11159 膜聯蛋白A2(ANXA2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Annexin A2 (ANXA2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11160 膜聯蛋白A2(ANXA2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Annexin A2 (ANXA2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11161 羧甲基賴氨酸(CML)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carboxymethyl Lysine (CML) 48T/96T General
11162 鐵調素(Hepc)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hepcidin (Hepc) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11163 白介素33(IL33)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 33 (IL33) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11164 內皮素受體A(ETRA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Endothelin Receptor A (ETRA) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11165 內皮素受體B(ETRB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Endothelin Receptor B (ETRB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11166 微管關聯蛋白τ(MAPτ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Microtubule Associated Protein Tau (MAPt) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11167 τ-蛋白激酶1(τPK1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tau-Protein Kinase 1 (tPK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11168 強啡肽(Dyn)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Big Dynorphin (Dyn) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11169 甘露糖結合蛋白(MBL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mannose Binding Lectin (MBL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11170 甘露聚糖結合凝集素關聯*蛋白酶1(MASP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mannose Associated Serine Protease 1 (MASP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11171 甘露聚糖結合凝集素關聯*蛋白酶1(MASP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mannose Associated Serine Protease 1 (MASP1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11172 上皮型脂肪酸結合蛋白(FABP5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal (FABP5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11173 凋亡相關因子配體(FASL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Factor Related Apoptosis Ligand (FASL) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11174 血紅素結合蛋白(HPX)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hemopexin (HPX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11175 蛋白激酶N2(PKN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Kinase N2 (PKN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11176 蛋白激酶N2(PKN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Kinase N2 (PKN2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11177 蛋白激酶N2(PKN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Kinase N2 (PKN2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11178 CD3d分子(CD3d)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 3d (CD3d) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11179 Toll樣受體1(TLR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 1 (TLR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11180 Toll樣受體3(TLR3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 3 (TLR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11181 骨形成蛋白1(BMP1)倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 1 (BMP1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11182 Toll樣受體5(TLR5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 5 (TLR5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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