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上海紀寧酶聯科技有限公司
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魚孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
魚孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在魚孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
11355 半乳凝素3(GAL3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Galectin 3 (GAL3) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11356 半乳凝素3(GAL3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Galectin 3 (GAL3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11357 轉化生長因子β誘導蛋白(TGFβI)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Induced Protein (TGFbI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11358 轉化生長因子β誘導蛋白(TGFβI)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Induced Protein (TGFbI) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11359 凝溶膠蛋白(GS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Gelsolin (GS) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11360 Ki-67蛋白(Ki67P)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ki-67 Protein (Ki67P) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11361 脂多糖結合蛋白(LBP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11362 細胞間粘附分子1(ICAM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11363 胰島素樣生長因子1(IGF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11364 頭蛋白(NOG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Noggin (NOG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11365 載脂蛋白C1(APOC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein C1 (APOC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11366 10kDa干擾素γ誘導蛋白(IP10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Gamma Induced Protein 10kDa (IP10) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11367 嗅素4(OLFM4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Olfactomedin 4 (OLFM4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11368 纖維介素蛋白(FGL2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibrinogen Like Protein 2 (FGL2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11369 *(SCT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Salmon Calcitonin (SCT) 48T/96T General
11370 末端補體復合體C5b-9(C5b-9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Terminal Complement Complex C5b-9 (C5b-9) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11371 IgG-Fc片段低親和力受體Ⅲb(FcγR3B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fc Fragment Of IgG Low Affinity IIIb Receptor (FcgR3B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11372 硬骨素(SOST)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sclerostin (SOST) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11373 補體因子I(CFI)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Factor I (CFI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11374 β-乳球蛋白(βLg)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Beta-Lactoglobulin (bLg) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11375 心肌型蘭尼定受體2(RYR2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ryanodine Receptor 2, Cardiac (RYR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11376 血管內皮生長因子A(VEGFA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11377 谷丙轉氨酶(ALT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alanine Aminotransferase (ALT) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11378 前動力蛋白受體1(PKR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prokineticin Receptor 1 (PKR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11379 前動力蛋白受體1(PKR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prokineticin Receptor 1 (PKR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11380 丙酮酸激酶(PK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11381 丙酮酸激酶(PK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11382 基質金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11383 基質金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11384 膽囊收縮素A受體(CCKAR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11385 膽囊收縮素A受體(CCKAR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11386 膽囊收縮素A受體(CCKAR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
11387 膽囊收縮素A受體(CCKAR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11388 基質金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11389 基質金屬蛋白酶7(MMP7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11390 基質金屬蛋白酶7(MMP7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11391 半乳凝素3(GAL3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Galectin 3 (GAL3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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