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上海紀寧酶聯科技有限公司
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魚雌二醇(E2)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
魚雌二醇(E2)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在魚雌二醇(E2)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
11477 角蛋白18(KRT18)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Keratin 18 (KRT18) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11478 抗存活素抗體(Anti-Surv)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Anti-Survivin Antibody (Anti-Surv) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11479 免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11480 白介素2(IL2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 2 (IL2) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11481 三磷酸腺苷(ATP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adenosine Triphosphate (ATP) 48T/96T General
11482 彈性蛋白酶4(ELA4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Elastase 4 (ELA4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11483 S100鈣結合蛋白B(S100B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein B (S100B) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11484 白蛋白(ALB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Albumin (ALB) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11485 *(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Anti Mullerian Hormone (AMH) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11486 載脂蛋白A1(APOA1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein A1 (APOA1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11487 多配體蛋白聚糖1(SDC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syndecan 1 (SDC1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11488 血小板衍生生長因子受體α(PDGFRα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor Receptor Alpha (PDGFRa) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11489 胸腺激活調節趨化因子(TARC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Thymus Activation Regulated Chemokine (TARC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11490 Apelin 13蛋白(AP13)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apelin 13 (AP13) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11491 防御素β2(DEFβ2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Defensin Beta 2 (DEFb2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11492 白介素31(IL31)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 31 (IL31) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11493 基質金屬蛋白酶23B(MMP23B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11494 基質金屬蛋白酶23B(MMP23B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11495 攝食抑制因子1(NES1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nesfatin 1 (NES1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11496 α1-微球蛋白(α1M)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor (a1M) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11497 干細胞因子(SCF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11498 干細胞因子(SCF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11499 干細胞因子(SCF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11500 干細胞因子(SCF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11501 干細胞因子(SCF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF) 48T/96T Chicken (Gallus)
11502 干細胞因子(SCF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11503 基質細胞衍生因子1(SDF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stromal Cell Derived Factor 1 (SDF1) 48T/96T Danio rerio (Zebrafish)
11504 轉化生長因子α(TGFα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Alpha (TGFa) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11505 轉化生長因子α(TGFα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Alpha (TGFa) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11506 轉化生長因子α(TGFα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Alpha (TGFa) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11507 轉化生長因子α(TGFα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Alpha (TGFa) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11508 轉化生長因子β1(TGFβ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11509 轉化生長因子β1(TGFβ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11510 轉化生長因子β1(TGFβ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11511 轉化生長因子β1(TGFβ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1) 48T/96T Danio rerio (Zebrafish)
11512 轉化生長因子β1(TGFβ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11513 髓細胞觸發受體1(TREM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Triggering Receptor Expressed On Myeloid Cells 1 (TREM1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11514 髓細胞觸發受體1(TREM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Triggering Receptor Expressed On Myeloid Cells 1 (TREM1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11515 髓細胞觸發受體1(TREM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Triggering Receptor Expressed On Myeloid Cells 1 (TREM1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11516 雙調蛋白(AREG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amphiregulin (AREG) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11517 雙調蛋白(AREG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amphiregulin (AREG) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11518 雙調蛋白(AREG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amphiregulin (AREG) 48T/96T Chicken魚雌二醇(E2)ELISA試劑盒 (Gallus)
11519 雙調蛋白(AREG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amphiregulin (AREG) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5魚雌二醇(E2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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