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上海紀寧酶聯科技有限公司
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魚促黃體激素(LH)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
魚促黃體激素(LH)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在魚促黃體激素(LH)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
11650 脂聯素受體1(ADIPOR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11651 脂聯素受體1(ADIPOR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11652 甲胎蛋白(αFP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 48T/96T Chicken (Gallus)
11653 甲胎蛋白(αFP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11654 甲胎蛋白(αFP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11655 *3(KLK3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kallikrein 3 (KLK3) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11656 血管生長素(ANG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiogenin (ANG) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11657 嗅素4(OLFM4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Olfactomedin 4 (OLFM4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11658 鱗狀細胞癌抗原2(SCCA2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Squamous Cell Carcinoma Antigen 2 (SCCA2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11659 白介素16(IL16)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 16 (IL16) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11660 白介素16(IL16)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 16 (IL16) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11661 白介素17(IL17)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 17 (IL17) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11662 白介素17(IL17)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 17 (IL17) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11663 成纖維細胞生長因子受體1(FGFR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor Receptor 1 (FGFR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11664 轉化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11665 成纖維細胞生長因子23(FGF23)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11666 胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6 (IGFBP6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11667 胰島素樣生長因子結合蛋白5(IGFBP5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5 (IGFBP5) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11668 轉化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11669 轉化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11670 淋巴細胞胞漿蛋白1(LCP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lymphocyte Cytosolic Protein 1 (LCP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11671 環胍氨酸肽(CCP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclical Citrullinated Peptide (CCP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11672 軟骨寡聚基質蛋白(COMP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11673 線粒體乙醛脫氫酶(ALDM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aldehyde Dehydrogenase, Mitochondrial (ALDM) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11674 腦型肌酸激酶(CKB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Creatine Kinase, Brain (CKB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11675 胰島素樣生長因子1(IGF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
11676 *4(VD4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vitamin D4 (VD4) 48T/96T General
11677 脂聯素(ADP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adiponectin (ADP) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11678 內脂素(VF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Visfatin (VF) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11679 血小板衍生生長因子AA(PDGFAA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor AA (PDGFAA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11680 主要堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Major Basic Protein (MBP) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11681 腎上腺髓質素(ADM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adrenomedullin (ADM) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11682 腎上腺髓質素(ADM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adrenomedullin (ADM) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11683 干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11684 干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11685 磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glypican 4 (GPC4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11686 干擾素調節因子3(IRF3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Regulatory Factor 3 (IRF3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11687 細胞外基質蛋白1(ECM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Extracellular Matrix Protein 1 (ECM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11688 腎上腺髓質素(ADM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adrenomedullin (ADM) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11689 干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11690 白介素1受體拮抗劑(IL1RA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11691 白介素1受體拮抗劑(IL1RA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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