魚類*(Cortisol)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在魚類*(Cortisol)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

12106 血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 3 (VEGFR3) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12107 表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白D(SPD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein D (SPD) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12108 紅細(xì)胞補體受體1(CR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Receptor 1, Erythrocyte (CR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12109 細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(EMMPRIN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Extracellular Matrix Metalloproteinase Inducer (EMMPRIN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12110 胃動素(MTL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Motilin (MTL) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12111 纖維蛋白原(FG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibrinogen (FG) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12112 肝細(xì)胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12113 脂聯(lián)素受體2(ADIPOR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adiponectin Receptor 2 (ADIPOR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12114 氨基端前腦鈉素(NT-ProBNP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
12115 脂聯(lián)素(ADP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adiponectin (ADP) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12116 組蛋白脫乙酰基酶2(HDAC2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 2 (HDAC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12117 血管緊張素Ⅲ(AngⅢ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiotensin III (AngIII) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12118 脊髓灰質(zhì)炎病毒受體相關(guān)分子4(PVRL4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Poliovirus Receptor Related Protein 4 (PVRL4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12119 胞漿磷蛋白1(STMN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stathmin 1 (STMN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12120 松弛肽(RLN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Relaxin (RLN) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12121 抗乙酸*受體抗體(Anti-AChR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Anti-Acetylcholine Receptor Antibody (Anti-AChR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12122 Slit同源物1(Slit1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Slit Homolog 1 (Slit1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12123 Ⅰ型前膠原(PCⅠ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Procollagen I (PCI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12124 Ⅲ型前膠原(PCⅢ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Procollagen III (PCIII) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12125 攝食抑制因子1(NES1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nesfatin 1 (NES1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12126 α白蛋白(AFM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Afamin (AFM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12127 催產(chǎn)素受體(OXTR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Oxytocin Receptor (OXTR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12128 熱休克轉(zhuǎn)錄因子2(HSF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heat Shock Transcription Factor 2 (HSF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12129 β2-微球蛋白(β2M)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Beta-2-Microglobulin (b2M) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12130 *S轉(zhuǎn)移酶ω1(GSTω1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Omega 1 (GSTo1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12131 C-型凝集素域家族4成員K(CLEC4K)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for C-Type Lectin Domain Family 4, Member K (CLEC4K) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12132 N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶1(ASAH1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Acylsphingosine Amidohydrolase 1 (ASAH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12133 兜甲蛋白(LOR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Loricrin (LOR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12134 鞘脂激活蛋白原(PSAP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prosaposin (PSAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12135 血管內(nèi)皮生長因子121(VEGF121)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor 121 (VEGF121) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12136 微粒體*S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12137 微粒體*S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12138 微粒體*S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Microsomal Glutathione S Transferase 1 (MGST1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12139 促甲狀腺素(TSH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Thyroid Stimulating Hormone (TSH) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12140 抵抗素(RETN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Resistin (RETN) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12141 多配體蛋白聚糖4(SDC4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syndecan 4 (SDC4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12142 甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Thyroxine Binding Globulin (TBG) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12143 基質(zhì)Gla蛋白(MGP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Gla Protein (MGP) 48T/96T Rattus norvegicus魚類*(Cortisol)ELISA試劑盒 (Rat)
12144 抑制素βE(INHβE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inhibin Beta E (INHbE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5魚類*(Cortisol)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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