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上海紀寧酶聯科技有限公司
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魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
12145 突觸素(SYP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synaptophysin (SYP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12146 Slit同源物2(Slit2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Slit Homolog 2 (Slit2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12147 囊性纖維化跨膜傳導調節因子(CFTR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12148 *S轉移酶θ2(GSTθ2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Theta 2 (GSTt2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12149 *S轉移酶θ2(GSTθ2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Theta 2 (GSTt2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12150 *S轉移酶θ2(GSTθ2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Theta 2 (GSTt2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12151 血小板衍生生長因子D(PDGFD)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor D (PDGFD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12152 組織蛋白酶C(CTSC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cathepsin C (CTSC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12153 VI型膠原(COL6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Type VI (COL6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12154 載脂蛋白C4(APOC4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein C4 (APOC4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12155 性別決定區Y框蛋白2(SOX2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sex Determining Region Y Box Protein 2 (SOX2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12156 八聚體結合轉錄因子4(OCT4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Octamer Binding Transcription Factor 4 (OCT4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12157 Kruppel樣因子4(KLF4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kruppel Like Factor 4, Gut (KLF4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12158 V-Myc骨髓細胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for V-Myc Myelocytomatosis Viral Oncogene Homolog (MYC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12159 氧化低密度脂蛋白(OxLDL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Oxidized Low Density Lipoprotein (OxLDL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12160 補體成分9(C9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Component 9 (C9) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12161 生長激素(GH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Hormone (GH) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12162 補體成分4a(C4a)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Component 4a (C4a) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12163 骨鈣素(OC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Osteocalcin (OC) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12164 趨化因子C-C-基元受體3(CCR3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 3 (CCR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12165 表面活性物質關聯蛋白B(SPB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein B (SPB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12166 平足蛋白(PDPN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Podoplanin (PDPN) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12167 補體成分5a(C5a)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Component 5a (C5a) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12168 血管內皮生長因子受體1(VEGFR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1 (VEGFR1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12169 阻抑素(PHB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prohibitin (PHB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12170 聚集蛋白聚糖(AGC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aggrecan (AGC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12171 鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12172 鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12173 蛋白激酶Cβ1(PKCβ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Kinase C Beta 1 (PKCb1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12174 骨形成蛋白1(BMP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 1 (BMP1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12175 脂蛋白a(Lpa)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lipoprotein, a (Lpa) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12176 雌激素受體β(ERβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Estrogen Receptor Beta (ERb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12177 對氧磷酶1(PON1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Paraoxonase 1 (PON1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12178 膜鐵轉運蛋白(FPN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ferroportin (FPN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12179 低密度脂蛋白受體相關蛋白2(LRP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 2 (LRP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12180 生長停滯特異性蛋白6(GAS6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Arrest Specific Protein 6 (GAS6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12181 突觸素(SYP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synaptophysin (SYP) 48T/96T Bos taurus; Bovine魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒 (Cattle)
12182 脂聯素(ADP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adiponectin (ADP) 48T/96T Chicken (Gallus)
12183 高香草酸(HVA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Homovanillic Acid (HVA) 48T/96T General
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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