山羊P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在山羊P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

12310 血管活性腸肽(VIP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vasoactive Intestinal Peptide (VIP) 48T/96T Chicken (Gallus)
12311 *1α(MEP1α)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Meprin A Alpha (MEP1a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12312 細(xì)胞程序性死亡蛋白1配體1(PDCD1LG1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1 (PDCD1LG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12313 絲蛋白Bβ(FLNβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Filamin B Beta (FLNb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12314 絲蛋白Cγ(FLNC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Filamin C Gamma (FLNC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12315 肥大細(xì)胞類*1(CMA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Chymase 1, Mast Cell (CMA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12316 催產(chǎn)素受體(OXTR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Oxytocin Receptor (OXTR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12317 肌球蛋白重鏈9(MYH9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle (MYH9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12318 肌球蛋白重鏈10(MYH10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle (MYH10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12319 泛醇*還原酶核心蛋白Ⅰ(UQCRC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ubiquinol Cytochrome C Reductase Core Protein I (UQCRC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12320 生長(zhǎng)分化因子1(GDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12321 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12322 鐵蛋白(FE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ferritin (FE) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12323 鐵調(diào)素(Hepc)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Hepcidin (Hepc) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12324 胰高血糖素樣肽1(GLP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glucagon Like Peptide 1 (GLP1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12325 成肌分化蛋白(MyoD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myogenic Differentiation (MyoD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12326 多配體蛋白聚糖1(SDC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Syndecan 1 (SDC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12327 尼克酰胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(NNMT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nicotinamide-N-Methyltransferase (NNMT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12328 Discoidin域受體家族成員1(DDR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Discoidin Domain Receptor Family, Member 1 (DDR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12329 微管關(guān)聯(lián)蛋白R(shí)P/EB家族成員1(MAPRE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Microtubule Associated Protein RP/EB Family, Member 1 (MAPRE1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12330 骨形成蛋白15(BMP15)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 15 (BMP15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12331 補(bǔ)體受體4(CR4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Complement Receptor 4 (CR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12332 轉(zhuǎn)醛縮酶(TALDO1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transaldolase (TALDO1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12333 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21(FGF21)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 21 (FGF21) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12334 二肽基肽酶10(DPP10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dipeptidyl Peptidase 10 (DPP10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12335 穿孔素1(PRF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Perforin 1 (PRF1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12336 骨膜蛋白(POSTN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Periostin (POSTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12337 腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
12338 雄烯酮(ADT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Androsterone (ADT) 48T/96T General
12339 α2-巨球蛋白(α2M)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Alpha-2-Macroglobulin (a2M) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12340 泛素結(jié)合酶E2A(UBE2A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2A (UBE2A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12341 Axis抑制蛋白2(AXIN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Axis Inhibition Protein 2 (AXIN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12342 端錨聚合酶1(TNKS1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tankyrase 1 (TNKS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12343 端錨聚合酶2(TNKS2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tankyrase 2 (TNKS2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12344 肌纖蛋白(MYOC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myocilin (MYOC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12345 肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移酶1A(CPT1A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carnitine Palmitoyltransferase 1A, Liver (CPT1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12346 叉頭框蛋白A2(FOXA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Forkhead Box Protein A2 (FOXA2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12347 回腸脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 6, Ileal (FABP6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12348 白細(xì)胞關(guān)聯(lián)免疫球蛋白樣受體2(LAIR2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Leukocyte Associated Immunoglobulin Like Receptor 2 (LAIR2) 48T/96T Homo sapiens 山羊P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒(Human)
12349 核仁素(NCL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleolin (NCL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5山羊P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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