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上海紀寧酶聯科技有限公司
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駱駝β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
駱駝β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在駱駝β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
12676 轉鐵蛋白(TRF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transferrin (TRF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12677 密封蛋白(OCLN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Occludin (OCLN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12678 丙糖磷酸異構酶1(TPI1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Triosephosphate Isomerase 1 (TPI1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12679 主要堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Major Basic Protein (MBP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12680 *-4-羥化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide I (P4Ha1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12681 CD5抗原樣蛋白(CD5L)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for CD5 Antigen Like Protein (CD5L) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12682 骨成型蛋白10(BMP10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 10 (BMP10) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12683 同種異體移植炎癥因子1(AIF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Allograft Inflammatory Factor 1 (AIF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12684 鞘氨醇1磷酸酯受體1(S1PR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sphingosine 1 Phosphate Receptor 1 (S1PR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12685 分揀蛋白1(SORT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sortilin 1 (SORT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12686 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2(APLP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amyloid Beta Precursor Like Protein 2 (APLP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12687 鈣離子轉運ATP酶A2(ATP2A2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ATPase, Ca++ Transporting, Cardiac Muscle, Slow Twitch 2 (ATP2A2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12688 尿調蛋白(UMOD)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Uromodulin (UMOD) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12689 S100鈣結合蛋白A8(S100A8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A8 (S100A8) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12690 S100鈣結合蛋白A9(S100A9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A9 (S100A9) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12691 蛋白Z依賴性蛋白酶抑制因子(ZPI)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Z Dependent Protease Inhibitor (ZPI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12692 賴氨酰氧化酶(LOX)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysyl Oxidase (LOX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12693 胞裂蛋白6(SEPT6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Septin 6 (SEPT6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12694 蛋氨酸腺苷轉移酶Ⅱα(MAT2α)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Methionine Adenosyltransferase II Alpha (MAT2a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12695 GPI錨定分子樣蛋白(GML)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glycosylphosphatidylinositol Anchored Molecule Like Protein (GML) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12696 B-細胞κ-輕肽基因增強子抑制因子激酶β(IκBKβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inhibitor Of Kappa-Light Polypeptide Gene Enhancer In B-Cells Kinase Beta (IkBKb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12697 核糖體蛋白L23A(RPL23A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribosomal Protein L23A (RPL23A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12698 同線蛋白2(ST2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntenin 2 (ST2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12699 Endoglin蛋白(ENG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Endoglin (ENG) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12700 CD19分子(CD19)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 19 (CD19) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12701 鉀中間小電導鈣激活通道蛋白亞家族N成員2(KCNN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Potassium Intermediate Small Conductance Calcium Activated Channel Subfamily N, Member 2 (KCNN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12702 白介素1家族成員9(IL1F9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Family, Member 9 (IL1F9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12703 增殖關聯蛋白2G4(PA2G4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Proliferation Associated Protein 2G4 (PA2G4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12704 類固醇5α還原酶1(SRD5α1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Steroid 5 Alpha Reductase 1 (SRD5a1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12705 膜聯蛋白A4(ANXA4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Annexin A4 (ANXA4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12706 角蛋白9(KRT9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Keratin 9 (KRT9) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12707 多功能蛋白聚糖(VS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Versican (VS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12708 密封蛋白(OCLN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Occludin (OCLN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12709 分泌型卷曲相關蛋白1(SFRP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 1 (SFRP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12710 運動因子相關蛋白1(MRP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Motility Related Protein (MRP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12711 骨成型蛋白3(BMP3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 3 (BMP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12712 非受體*激酶2(TNK2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tyrosine Kinase, Non Receptor 2 (TNK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12713 封閉蛋白2(CLDN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 2 (CLDN2) 48T/96T Mus musculus駱駝β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 (Mouse)
12714 肌鈀蛋白(MYPN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Myopalladin (MYPN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12715 血管非炎性蛋白1(VNN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vanin 1 (VNN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5駱駝β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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