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上海紀寧酶聯科技有限公司
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駱駝內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
駱駝內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在駱駝內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
12754 前列腺蛋白類脂肪酶B(LIPB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lipophilin B, Prostatein Like (LIPB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12755 β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βACE1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Beta-Site APP Cleaving Enzyme 1 (bACE1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12756 早老素1(PSEN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Presenilin 1 (PSEN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12757 血管非炎性蛋白1(VNN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vanin 1 (VNN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12758 鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2α)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Alpha (CAMK2a) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12759 拓撲異構酶Ⅱβ(TOP2β)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Topoisomerase II Beta (TOP2b) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12760 再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma (REG3g) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12761 異連蛋白β(DTNβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dystrobrevin Beta (DTNb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12762 脊椎蛋白1(SPON1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Spondin 1 (SPON1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12763 互聯蛋白神經元中間絲蛋白α(INα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Internexin Neuronal Intermediate Filament Protein Alpha (INa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12764 Lin-28同源物A(LIN28A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lin-28 Homolog A (LIN28A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12765 組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12766 受磷蛋白(PLN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phospholamban (PLN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12767 無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3A (WNT3A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12768 再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma (REG3g) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12769 蘭尼定受體1(RYR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ryanodine Receptor 1, Skeletal (RYR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12770 核因子I/B(NFIB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nuclear Factor I/B (NFIB) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12771 R-脊椎蛋白1(RSPO1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for R-Spondin 1 (RSPO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12772 神經顆粒素(NRGN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neurogranin (NRGN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12773 橋粒聯結蛋白(AHNAK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Desmoyokin (AHNAK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12774 肌鈣蛋白T(TNT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Troponin T (TNT) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12775 分泌跨膜蛋白1(SECTM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secreted And Transmembrane Protein 1 (SECTM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12776 肥大細胞類*1(CMA1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chymase 1, Mast Cell (CMA1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12777 無翅型MMTV整合位點家族成員3(WNT3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3 (WNT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12778 無翅型MMTV整合位點家族成員2(WNT2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 2 (WNT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12779 無翅型MMTV整合位點家族成員1(WNT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 1 (WNT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12780 序列相似家族5成員C(FAM5C)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 5, Member C (FAM5C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12781 白三烯A4水解酶(LTA4H)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Leukotriene A4 Hydrolase (LTA4H) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12782 芳香烴受體核轉位因子樣蛋白(ARNTL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator Like Protein (ARNTL) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12783 核受體亞家族1D組成員2(NR1D2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nuclear Receptor Subfamily 1, Group D, Member 2 (NR1D2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12784 粘蛋白4(MUC4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mucin 4 (MUC4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12785 *結合球蛋白(CBG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Corticosteroid Binding Globulin (CBG) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12786 防御素α1(DEFα1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Defensin Alpha 1, Neutrophil (DEFa1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12787 四旋蛋白30(TSPAN30)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tetraspanin 30 (TSPAN30) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12788 細胞色素P450家族成員1A1(CYP1A1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytochrome P450 1A1 (CYP1A1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12789 雌激素受體相關受體α(ERRα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Estrogen Related Receptor Alpha (ERRa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12790 極低密度脂蛋白受體(VLDLR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Very Low Density Lipoprotein Receptor (VLDLR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12791 淀粉樣前體蛋白(APP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amyloid Precursor Protein (APP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12792 E1A結合蛋白P300(EP300)檢測試劑盒駱駝內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for E1A Binding Protein P300 (EP300) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12793 周期素依賴性激酶抑制因子1A(CDKN1A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 1A (CDKN1A) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5駱駝內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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