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上海紀寧酶聯科技有限公司
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猴Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
猴Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在猴Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
12953 嗜酸性粒細胞過氧化物酶(EPX)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Eosinophil Peroxidase (EPX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12954 蛋白聚糖4(PRG4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Proteoglycan 4 (PRG4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12955 X-連鎖凋亡蛋白抑制因子(XIAP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for X-Linked Inhibitor Of Apoptosis Protein (XIAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12956 血小板衍生生長因子C(PDGFC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor C (PDGFC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12957 泛素特異性肽酶8(USP8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin Specific Peptidase 8 (USP8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12958 醌NADH脫氫酶1(NQO1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12959 醌NADH脫氫酶1(NQO1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12960 和肽素(CPP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Copeptin (CPP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12961 白介素1β(IL1β)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
12962 載脂蛋白L1(APOL1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein L (APOL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12963 四旋蛋白30(TSPAN30)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tetraspanin 30 (TSPAN30) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12964 粘蛋白13(MUC13)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mucin 13, Cell Surface Associated (MUC13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12965 RAD54樣蛋白2(RAD54L2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for RAD54 Like Protein 2 (RAD54L2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12966 S100鈣結合蛋白A4(S100A4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A4 (S100A4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12967 亨廷頓蛋白(HTT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Huntingtin (HTT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12968 染色質域解旋酶DNA結合蛋白4(CHD4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 4 (CHD4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12969 R-脊椎蛋白1(RSPO1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for R-Spondin 1 (RSPO1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12970 肌營養不良蛋白關聯糖蛋白1(DAG1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dystrophin Associated Glycoprotein 1 (DAG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12971 雙糖鏈蛋白聚糖(BGN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Biglycan (BGN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12972 組織蛋白酶D(CTSD)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cathepsin D (CTSD) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12973 組織蛋白酶D(CTSD)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cathepsin D (CTSD) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12974 間皮素(MSLN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mesothelin (MSLN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12975 突觸極蛋白2(SYNPO2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synaptopodin 2 (SYNPO2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12976 角膜蛋白(KERA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Keratocan (KERA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12977 正五聚蛋白3(PTX3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pentraxin 3, Long (PTX3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12978 中間α-球蛋白抑制因子H5(ITIH5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H5 (ITIH5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12979 中間α-球蛋白抑制因子H2(ITIH2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H2 (ITIH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12980 中間α-球蛋白抑制因子H1(ITIH1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H1 (ITIH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12981 CD72分子(CD72)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 72 (CD72) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12982 血漿*過氧化物酶(GPX3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 3, Plasma (GPX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12983 神經軟骨蛋白(NCDN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neurochondrin (NCDN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12984 前蛋白轉化酶枯草溶菌素5(PCSK5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 5 (PCSK5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12985 血清淀粉樣P物質(SAP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Serum Amyloid P Component (SAP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12986 粒細胞趨化蛋白2(GCP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Granulocyte Chemotactic Protein 2 (GCP2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12987 胃動蛋白2(GKN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Gastrokine 2 (GKN2) 48T/96T Rattus norvegicus 猴Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒(Rat)
12988 血管生成素樣蛋白7(ANGPTL7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 7 (ANGPTL7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5猴Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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