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上海紀寧酶聯科技有限公司
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猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
13027 肽酶抑制因子16(PI16)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peptidase Inhibitor 16 (PI16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13028 肌營養不良蛋白(DMD)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dystrophin (DMD) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13029 血小板反應蛋白解整合素金屬肽酶7(ADAMTS7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 7 (ADAMTS7) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13030 序列相似家族3成員B(FAM3B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 3, Member B (FAM3B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13031 Slit同源物3(Slit3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Slit Homolog 3 (Slit3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13032 Slit同源物3(Slit3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Slit Homolog 3 (Slit3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13033 白介素18受體1(IL18R1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 18 Receptor 1 (IL18R1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13034 白介素18受體輔助蛋白(IL18RAP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 18 Receptor Accessory Protein (IL18RAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13035 再生胰島衍生蛋白1β(REG1β)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 1 Beta (REG1b) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13036 賴氨酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 2 (LOXL2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13037 鈣同線蛋白2(CLSTN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calsyntenin 2 (CLSTN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13038 甘露糖結合凝集素2(LMAN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lectin, Mannose Binding 2 (LMAN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13039 鈣調寧蛋白1(CNN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calponin 1, Basic (CNN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13040 蛋白Z(PROZ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Z (PROZ) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13041 促腎上腺皮質素釋放激素結合蛋白(CRHBP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Corticotropin Releasing Hormone Binding Protein (CRHBP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13042 WNT1誘導信號通道蛋白1(WISP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for WNT1 Inducible Signaling Pathway Protein 1 (WISP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13043 內皮素2(EDN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Endothelin 2 (EDN2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13044 血管舒張劑激活磷蛋白(VASP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vasodilator Stimulated Phosphoprotein (VASP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13045 神經疾病靶標酯酶(NTE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuropathy Target Esterase (NTE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13046 整合素αV(ITGαV)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Alpha V (ITGaV) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13047 基質重塑關聯蛋白5(MXRA5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Remodelling Associated Protein 5 (MXRA5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13048 斯鈣素1(STC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stanniocalcin 1 (STC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13049 Klotho蛋白(KL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Klotho (KL) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13050 層黏連蛋白受體1(LAMR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Laminin Receptor 1 (LAMR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13051 心營養素樣細胞因子1(CLCF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cardiotrophin Like Cytokine Factor 1 (CLCF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13052 細胞骨架活性調節蛋白(ARC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Activity Regulated Cytoskeleton Associated Protein (ARC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13053 生長分化因子3(GDF3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13054 生長分化因子3(GDF3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13055 多巴胺轉運蛋白(DAT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dopamine Transporter (DAT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13056 異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Isocitrate Dehydrogenase 1, Soluble (IDH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13057 骨髓基質細胞抗原2(BST2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bone Marrow Stromal Cell Antigen 2 (BST2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13058 膜鐵轉運蛋白(FPN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ferroportin (FPN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13059 Ⅳ型膠原α3(COL4α3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Type IV Alpha 3 (COL4a3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13060 原鈣黏素15(PCDH15)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protocadherin 15 (PCDH15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13061 銅伴侶超氧化物歧化酶(SOD4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Superoxide Dismutase, Copper Chaperone (SOD4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13062 過氧化還原酶1(PRDX1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peroxiredoxin 1 (PRDX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13063 外生骨疣樣蛋白1(EXTL1)猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Exostoses Like Protein 1 (EXTL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13064 RAD23同源物B(RAD23B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for RAD23 Homolog B (RAD23B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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