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上海紀寧酶聯科技有限公司
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猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
13151 氨酰tRNA合成酶復合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aminoacyl tRNA Synthetase Complex Interacting Multifunctional Protein 1 (AIMP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13152 堿性唾液*豐富蛋白2(PRB2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Basic Salivary Proline Rich Protein 2 (PRB2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13153 堿性唾液*豐富蛋白1(PRB1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Basic Salivary Proline Rich Protein 1 (PRB1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13154 Dickkopf相關蛋白4(DKK4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dickkopf Related Protein 4 (DKK4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13155 Dickkopf相關蛋白4(DKK4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dickkopf Related Protein 4 (DKK4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13156 天冬氨酸β羥化酶(ASPH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aspartate Beta Hydroxylase (ASPH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13157 分泌型卷曲相關蛋白2(SFRP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 2 (SFRP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13158 序列相似家族3成員B(FAM3B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 3, Member B (FAM3B) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13159 含膠原三螺旋重復蛋白1(CTHRC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Triple Helix Repeat Containing Protein 1 (CTHRC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13160 AE結合蛋白1(AEBP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for AE Binding Protein 1 (AEBP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13161 微管蛋白β1(TUBβ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tubulin Beta 1 (TUBb1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13162 酶原顆粒膜糖蛋白(GP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glycoprotein 2, Zymogen Granule Membrane (GP2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13163 花生四烯酸脂加氧酶3(ALOXE3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Arachidonate Lipoxygenase 3 (ALOXE3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13164 癌胚抗原相關細胞粘附分子6(CEACAM6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carcinoembryonic Antigen Related Cell Adhesion Molecule 6 (CEACAM6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13165 線粒體解偶聯蛋白1(UCP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Uncoupling Protein 1, Mitochondrial (UCP1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13166 F-框*豐富重復蛋白3(FBXL3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for F-Box And Leucine Rich Repeat Protein 3 (FBXL3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13167 脂肪酸合酶(FASN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fatty Acid Synthase (FASN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13168 金屬硫蛋白1M(MT1M)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Metallothionein 1M (MT1M) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13169 Vasorin蛋白(VASN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vasorin (VASN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13170 精胺氧化酶(SMOX)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Spermine Oxidase (SMOX) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13171 *棕櫚酰轉移酶長鏈堿性亞基1(SPTLC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Serine Palmitoyltransferase, Long Chain Base Subunit 1 (SPTLC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13172 基質金屬蛋白酶9(MMP9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
13173 5羥色胺轉運蛋白(SERT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Serotonin Transporter (SERT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13174 3-羥基3-甲基戊二酰*還原酶(HMGCR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 3-Hydroxy-3-Methylglutaryl Coenzyme A Reductase (HMGCR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13175 鈣調蛋白樣蛋白5(CALML5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calmodulin Like Protein 5 (CALML5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13176 軟骨關聯蛋白(CRTAP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cartilage Associated Protein (CRTAP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13177 AF4/FMR2家族成員1(AFF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for AF4/FMR2 Family, Member 1 (AFF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13178 白介素1家族成員9(IL1F9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Family, Member 9 (IL1F9) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13179 基質金屬蛋白酶2(MMP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
13180 次黃嘌呤磷酸核糖基轉移酶1(HPRT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13181 WNT抑制因子1(WIF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for WNT Inhibitory Factor 1 (WIF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13182 腎足蛋白(NPHN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nephrin (NPHN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13183 CD200分子(CD200)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 200 (CD200) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13184 干擾素α/β受體2(IFNα/βR2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Alpha/Beta Receptor 2 (IFNa/bR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13185 腺嘌呤磷酸核糖轉移酶(APRT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adenine Phosphoribosyltransferase (APRT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13186 脫氧胞苷激酶(DCK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Deoxycytidine Kinase (DCK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13187 可溶性胸苷激酶1(TK1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Thymidine Kinase 1, Soluble (TK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13188 氫/鉀離子交換ATP酶α肽(ATP4α)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ATPase, H+/K+ Exchanging Alpha Polypeptide (ATP4a) 48T/96T Mus musculus猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 (Mouse)
13189 衰老關鍵蛋白3(FBLN3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibulin 3 (FBLN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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