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上海紀寧酶聯科技有限公司
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猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
13232 碳酸酐酶Ⅲ(CA3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carbonic Anhydrase III, Muscle Specific (CA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13233 補體成分1q子成分A(C1qA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Component 1, Q Subcomponent A (C1qA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13234 17-β-羥基類固醇脫氫酶14(HSD17β14)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 14 (HSD17b14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13235 多聚蛋白2(MMRN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Multimerin 2 (MMRN2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13236 磷脂酰乙醇胺結合蛋白1(PEBP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphatidylethanolamine Binding Protein 1 (PEBP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13237 氫離子電壓門控通道蛋白1(HVCN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hydrogen Voltage Gated Channel Protein 1 (HVCN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13238 */*豐富卷曲螺旋蛋白1(PSRC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Proline/Serine Rich Coiled Coil protein 1 (PSRC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13239 ATP結合盒轉運蛋白A3(ABCA3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ATP Binding Cassette Transporter A3 (ABCA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13240 類*β2(TPSβ2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tryptase Beta 2 (TPSb2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13241 尿黑酸1,2-雙加氧酶(HGD)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Homogentisate-1,2-Dioxygenase (HGD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13242 羧肽酶N1(CPN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carboxypeptidase N1 (CPN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13243 蛋白酶體亞基β6(PSMβ6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Proteasome Subunit Beta Type 6 (PSMb6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13244 轉位因子蛋白(TSPO)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Translocator Protein (TSPO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13245 金屬硫蛋白3(MT3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Metallothionein 3 (MT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13246 安定結合抑制因子(DBI)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Diazepam Binding Inhibitor (DBI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13247 嗜鉻蛋白B(CHGB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chromogranin B (CHGB) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13248 肝再生擴展生長因子(GFER)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Factor, Augmenter Of Liver Regeneration (GFER) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13249 BMP激活素膜結合抑制因子同源物(BAMBI)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for BMP And Activin Membrane Bound Inhibitor Homolog (BAMBI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13250 跨膜蛋白2樣蛋白(TMEM2L)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transmembrane Protein 2 Like Protein (TMEM2L) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13251 半**豐富蛋白1(CSRP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cysteine And Glycine Rich Protein 1 (CSRP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13252 二甲基*二甲胺水解酶1(DDAH1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dimethylarginine Dimethylaminohydrolase 1 (DDAH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13253 *同源物B(COQ10B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Coenzyme Q10 Homolog B (COQ10B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13254 Jagged 1蛋白(JAG1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Jagged 1 Protein (JAG1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13255 V-Rel網狀內皮增生病毒癌基因同源物B(RELB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for V-Rel Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog B (RELB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13256 成纖維細胞生長因子13(FGF13)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 13 (FGF13) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13257 10kDa熱休克蛋白1(HSP10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heat Shock 10kDa Protein 1 (HSP10) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13258 組蛋白H4(H4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Histone H4 (H4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13259 利鈉肽受體1(NPR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Natriuretic Peptide Receptor 1 (NPR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13260 利鈉肽受體3(NPR3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Natriuretic Peptide Receptor 3 (NPR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13261 角蛋白2(KRT2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Keratin 2 (KRT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13262 膽鹽依賴性脂肪酶(BSDL)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lipase, Bile Salt Dependent (BSDL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13263 腎上腺素能受體α2C(ADRα2C)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adrenergic Receptor Alpha 2C (ADRa2C) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13264 羧基端結合蛋白2(CTBP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for C-Terminal Binding Protein 2 (CTBP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13265 胞裂蛋白12(SEPT12)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Septin 12 (SEPT12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13266 十四烷基化*豐富蛋白激酶C底物(MARCKS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Myristoylated Alanine Rich Protein Kinase C Substrate (MARCKS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13267 巨軸索神經蛋白(GAN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Gigaxonin (GAN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13268 周期素依賴性激酶抑制因子3(CDKN3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3 (CDKN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13269 多聚免疫球蛋白受體(PIGR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Polymeric Immunoglobulin Receptor (PIGR) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13270 11-β-羥基類固醇脫氫酶1(HSD11β1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1 (HSD11b1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13271 神經肽Y受體Y5(NPY5R)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y5 (NPY5R) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13272 胃動蛋白2(GKN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Gastrokine 2 (GKN2) 48T/96T Homo sapiens猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 (Human)
13273 脂多糖結合蛋白(LBP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5猴γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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