猴胰島素(INS)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在猴胰島素(INS)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

13275 丁酰*酯酶(BCHE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Butyrylcholinesterase (BCHE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13276 突觸融合蛋白2(STX2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Syntaxin 2 (STX2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13277 突觸融合蛋白1A(STX1A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Syntaxin 1A, Brain (STX1A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13278 *半*連接酶催化亞基(GCLC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glutamate Cysteine Ligase, Catalytic (GCLC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13279 Bcl2樣蛋白11(BCL2L11)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Bcl2 Like Protein 11 (BCL2L11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13280 基質(zhì)金屬蛋白酶25(MMP25)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 25 (MMP25) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13281 Ⅵ型膠原α3(COL6α3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Collagen Type VI Alpha 3 (COL6a3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13282 轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族M成員1(TRPM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 1 (TRPM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13283 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子18(FGF18)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 18 (FGF18) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13284 彈性蛋白酶3B(ELA3B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Elastase 3B (ELA3B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13285 TNF受體關(guān)聯(lián)因子6(TRAF6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for TNF Receptor Associated Factor 6 (TRAF6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13286 旁血小板溶蛋白(PPL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Periplakin (PPL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13287 淋巴細(xì)胞抗原96(LY96)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lymphocyte Antigen 96 (LY96) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13288 Diaphanous同源物1(DIAPH1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Diaphanous Homolog 1 (DIAPH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13289 解整合素金屬蛋白酶22(ADAM22)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 22 (ADAM22) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13290 電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白α肽(ETFα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Electron Transfer Flavoprotein Alpha Polypeptide (ETFa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13291 精氨基琥珀酸合成酶1(ASS1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Argininosuccinate Synthetase 1 (ASS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13292 蛋白二硫化物異構(gòu)酶A6(PDIA6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase A6 (PDIA6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13293 半*蛋白酶抑制劑6(CST6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cystatin 6 (CST6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13294 促泌素(SCGN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Secretagogin (SCGN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13295 促泌素(SCGN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Secretagogin (SCGN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13296 賴(lài)氨酰氧化酶樣蛋白4(LOXL4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 4 (LOXL4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13297 內(nèi)皮細(xì)胞特異分子1(ESM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Endothelial Cell Specific Molecule 1 (ESM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13298 金屬硫蛋白1E(MT1E)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Metallothionein 1E (MT1E) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13299 *Ⅵ(F6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Coagulation Factor VI (F6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13300 無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員4(WNT4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 4 (WNT4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13301 USP6氨基端樣蛋白(USP6NL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for USP6 N-Terminal Like Protein (USP6NL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13302 血幼素(HJV)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Hemojuvelin (HJV) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13303 鹽皮質(zhì)激素受體(MR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Mineralocorticoid Receptor (MR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13304 AMPA離子能*受體1(GRIA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glutamate Receptor, Ionotropic, AMPA 1 (GRIA1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13305 N-甲基-D-天氡氨酸離子能*受體1(GRIN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 1 (GRIN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13306 殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Bactericidal/Permeability Increasing Protein (BPI) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13307 骨骼肌肌動(dòng)蛋白α1(ACTα1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Actin Alpha 1, Skeletal Muscle (ACTa1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13308 骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Troponin T Type 1, Slow Skeletal (TNNT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13309 細(xì)胞色素P450家族成員1B1(CYP1B1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cytochrome P450 1B1 (CYP1B1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13310 肌球蛋白重鏈6(MYH6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 6, Cardiac Muscle, Alpha (MYH6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13311 絲裂原激活蛋白激酶激酶1(MAP2K1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1 (MAP2K1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13312 血小板反應(yīng)蛋白2(THBS2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Thrombospondin 2 (THBS2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13313 肝配蛋白A受體10(EPHA10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ephrin Type A Receptor 10 (EPHA10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13314 轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族M成員6(TRPM6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 6 (TRPM6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13315 轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族M成員7(TRPM7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 7 (TRPM7) 48T/96T Rattus norvegicus猴胰島素(INS)ELISA試劑盒 (Rat)
13316 轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族V成員1(TRPV1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily V, Member 1 (TRPV1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5猴胰島素(INS)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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