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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-14 23:54:07瀏覽次數(shù):461次
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鴨子碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
鴨子碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在鴨子碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
13801 NEL樣蛋白2(NELL2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for NEL Like Protein 2 (NELL2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13802 角蛋白14(KRT14)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Keratin 14 (KRT14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13803 *果糖-6-磷酸轉氨酶2(GFPT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutamine Fructose-6-Phosphate Transaminase 2 (GFPT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13804 二肽基肽酶6(DPP6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dipeptidyl Peptidase 6 (DPP6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13805 反式高爾基體網(wǎng)狀結構蛋白2(TGOLN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Trans Golgi Network Protein 2 (TGOLN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13806 內(nèi)凝集蛋白2(ITLN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inectin 2 (ITLN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13807 鋅指同源框蛋白1B(ZFHX1B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Zinc Finger Homeobox Protein 1B (ZFHX1B) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13808 DnaJ/Hsp40同源物亞家族C成員12(DNAJC12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for DnaJ/HSP40 Homolog Subfamily C, Member 12 (DNAJC12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13809 殺傷細胞免疫球蛋白樣受體3DL1(KIR3DL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Killer Cell Immunoglobulin Like Receptor 3DL1 (KIR3DL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13810 節(jié)律晝夜蛋白1(PER1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Period Circadian Protein 1 (PER1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13811 Clock同源物(CLOCK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Clock Homolog (CLOCK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13812 轉膠蛋白(TAGLN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transgelin (TAGLN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13813 隱花色素1(CRY1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cryptochrome 1 (CRY1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13814 配對框基因9(PAX9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Paired Box Gene 9 (PAX9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13815 過氧化還原酶4(PRDX4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peroxiredoxin 4 (PRDX4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13816 X-射線修復交叉互補蛋白6(XRCC6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for X-Ray Repair Cross Complementing 6 (XRCC6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13817 DNA修復蛋白RAD50(RAD50)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for DNA Repair Protein RAD50 (RAD50) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13818 髓細胞觸發(fā)受體1(IREM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immune Receptor Expressed On Myeloid Cells 1 (IREM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13819 印度刺猬因子(IHH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hedgehog Homolog, Indian (IHH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13820 POTE錨蛋白域家族成員G(POTEG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for POTE Ankyrin Domain Family, Member G (POTEG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13821 Neudesin神經(jīng)營養(yǎng)因子(NENF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neudesin Neurotrophic Factor (NENF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13822 細胞色素P450家族成員7A1(CYP7A1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytochrome P450 7A1 (CYP7A1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13823 高遷移率族AT Hook蛋白1(HMGA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for High Mobility Group AT Hook Protein 1 (HMGA1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
13824 白介素3受體α(IL3Rα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 3 Receptor Alpha (IL3Ra) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13825 神經(jīng)肽Y受體Y1(NPY1R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y1 (NPY1R) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13826 神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y2 (NPY2R) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13827 白介素17D(IL17D)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 17D (IL17D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13828 肽基*脫亞氨酶Ⅳ(PADI4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peptidyl Arginine Deiminase Type IV (PADI4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13829 基質金屬蛋白酶16(MMP16)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 16 (MMP16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13830 封閉蛋白4(CLDN4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 4 (CLDN4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13831 高爾基蛋白73(GP73)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Golgi Protein 73 (GP73) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13832 信號素4D(SEMA4D)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Semaphorin 4D (SEMA4D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13833 信號淋巴細胞激活分子家族成員7(SLAMF7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Signaling Lymphocytic Activation Molecule Family, Member 7 (SLAMF7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13834 叢狀蛋白B1(PLXNB1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plexin B1 (PLXNB1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13835 食道癌相關基因4(ECRG4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Esophageal Cancer Related Gene 4 (ECRG4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13836 泛素交叉反應蛋白(UCRP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin Cross Reactive Protein (UCRP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13837 細胞球蛋白(CYGB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytoglobin (CYGB) 48T/96T Rattus norvegicus 鴨子碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒(Rat)
13838 內(nèi)皮細胞粘附分子(ESAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Endothelial Cell Adhesion Molecule (ESAM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13839 Epigen蛋白(EPG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Epigen (EPG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5鴨子碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質控、室間質評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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