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上海紀寧酶聯科技有限公司
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鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
13841 甘露糖受體C2(MRC2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mannose Receptor C Type 2 (MRC2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13842 防御素β103B(DEFβ103B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Defensin Beta 103B (DEFB103B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13843 血小板激活因子(PAF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plaet Activating Factor (PAF) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
13844 肝型脂肪酸結合蛋白(FABP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 1, Liver (FABP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13845 黃嘌呤脫氫酶(XDH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Xanthine Dehydrogenase (XDH) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
13846 白介素1η(IL1η)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Eta (IL1h) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13847 卷曲同源物6(FZD6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Frizzled Homolog 6 (FZD6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13848 富酪蛋白(STATH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Statherin (STATH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13849 整合素α1(ITGα1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Alpha 1 (ITGa1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13850 細胞因子信號轉導抑制因子1(SOCS1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Suppressors Of Cytokine Signaling 1 (SOCS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13851 CD200受體1(CD200R1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for CD200 Receptor 1 (CD200R1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13852 二酰甘油-O-酰基轉移酶同源物1(DGAT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Diacylglycerol-O-Acyltransferase Homolog 1 (DGAT1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13853 Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Wolfram Syndrome Protein 1 (WFS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13854 Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Wolfram Syndrome Protein 1 (WFS1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13855 Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Wolfram Syndrome Protein 1 (WFS1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13856 表面活性物質關聯蛋白J(SPJ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein J (SPJ) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13857 白介素25(IL25)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 25 (IL25) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13858 可溶性半乳糖凝集素3結合蛋白(LGALS3BP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lectin Galactoside Binding, Soluble 3 Binding Protein (LGALS3BP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13859 ⅩⅤ型膠原(COL15)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Type XV (COL15) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13860 細胞外基質蛋白1(ECM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Extracellular Matrix Protein 1 (ECM1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13861 封閉蛋白3(CLDN3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 3 (CLDN3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13862 封閉蛋白5(CLDN5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 5 (CLDN5) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13863 多胺調節因子1結合蛋白1(PMFBP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Polyamine Modulated Factor 1 Binding Protein 1 (PMFBP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13864 載脂蛋白O(APOO)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein O (APOO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13865 纖維鞘相互作用蛋白1(FSIP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibrous Sheath Interacting Protein 1 (FSIP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13866 連接附著分子3(JAM3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Junctional Adhesion Molecule 3 (JAM3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13867 連接附著分子1(JAM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Junctional Adhesion Molecule 1 (JAM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13868 中間絲蛋白(SYNC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syncoilin (SYNC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13869 抵抗素樣蛋白β(RETNLβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Resistin Like Beta (RETNLb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13870 毒蕈堿型*受體M2(CHRM2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 2 (CHRM2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13871 毒蕈堿型*受體M2(CHRM2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 2 (CHRM2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13872 胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Thymic Stromal Lymphopoietin (TSLP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13873 L1-細胞粘附分子(L1CAM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for L1-Cell Adhesion Molecule (L1CAM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13874 天冬酰胺合成酶(ASNS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Asparagine Synthetase (ASNS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13875 白細胞彈性蛋白酶抑制因子(LEI)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Leukocyte Elastase Inhibitor (LEI) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13876 蛋白*磷酸酶受體G(PTPRG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type G (PTPRG) 48T/96T Homo sapiens鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒 (Human)
13877 興奮性氨基酸轉運蛋白1(EAAT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Excitatory Amino Acid Transporter 1 (EAAT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13878 驅動蛋白家族成員5A(KIF5A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kinesin Family, Member 5A (KIF5A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13879 驅動蛋白家族成員18A(KIF18A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kinesin Family, Member 18A (KIF18A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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