鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質量。

14000 大腸桿菌宿主殘留蛋白(ECP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Escherichia coli Protein (ECP) 48T/96T General
14001 纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibrinogen Like Protein 1 (FGL1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14002 剪切修復交叉互補修復缺陷偶聯(lián)因子1(ERCC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Excision Repair Cross Complementing Rodent Repair Deficiency Complementation 1 (ERCC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14003 死亡關聯(lián)蛋白激酶3(DAPK3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Death Associated Protein Kinase 3 (DAPK3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14004 核有絲分裂器蛋白1(NUMA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nuclear Mitotic Apparatus Protein 1 (NUMA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14005 S100鈣結合蛋白A2(S100A2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A2 (S100A2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14006 血管緊張素1-7(Ang1-7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiotensin 1-7 (Ang1-7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14007 驅動蛋白家族成員14(KIF14)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kinesin Family, Member 14 (KIF14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14008 V-Myc骨髓細胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for V-Myc Myelocytomatosis Viral Oncogene Homolog (MYC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14009 分泌粒蛋白Ⅲ(SCG3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secretogranin III (SCG3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14010 白細胞關聯(lián)免疫球蛋白樣受體1(LAIR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Leukocyte Associated Immunoglobulin Like Receptor 1 (LAIR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14011 *脫羧酶(ODC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ornithine Decarboxylase (ODC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14012 表皮轉*酶(TGM3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transglutaminase 3, Epidermal (TGM3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14013 角質轉*酶(TGM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transglutaminase 1, Keratinocyte (TGM1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14014 干擾素α(IFNα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Alpha (IFNa) 48T/96T Ovis aries; Ovine (Sheep)
14015 凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apoptotic Peptidase Activating Factor 1 (APAF1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14016 凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apoptotic Peptidase Activating Factor 1 (APAF1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
14017 白介素31(IL31)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 31 (IL31) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14018 多效生長因子(PTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pleiotrophin (PTN) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
14019 多效生長因子(PTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pleiotrophin (PTN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14020 多效生長因子(PTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pleiotrophin (PTN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
14021 絲切蛋白1(CFL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cofilin 1, Non Muscle (CFL1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14022 絲切蛋白1(CFL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cofilin 1, Non Muscle (CFL1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
14023 淋巴毒素β(LTβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lymphotoxin Beta (LTb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14024 淋巴毒素β(LTβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lymphotoxin Beta (LTb) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
14025 溶酶體關聯(lián)膜蛋白1(LAMP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysosomal Associated Membrane Protein 1 (LAMP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14026 CD200受體2(CD200R2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for CD200 Receptor 2 (CD200R2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14027 膽綠素還原酶B(BLVRB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Biliverdin Reductase B (BLVRB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14028 膽綠素還原酶A(BLVRA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Biliverdin Reductase A (BLVRA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14029 粒細胞趨化蛋白2(GCP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Granulocyte Chemotactic Protein 2 (GCP2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14030 二級淋巴組織趨化因子(SLC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secondary Lymphoid Tissue Chemokine (SLC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14031 B-淋巴細胞趨化因子1(BLC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for B-Lymphocyte Chemoattractant 1 (BLC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14032 B-淋巴細胞趨化因子1(BLC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for B-Lymphocyte Chemoattractant 1 (BLC1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
14033 胸腎表達趨化因子(BRAK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Breast And Kidney Expressed Chemokine (BRAK) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
14034 白介素28A(IL28A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 28A (IL28A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14035 生長分化因子2(GDF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 2 (GDF2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
14036 白介素17B(IL17B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 17B (IL17B) 48T/96T Mus musculus鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒 (Mouse)
14037 成纖維細胞生長因子10(FGF10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 10 (FGF10) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現(xiàn)在國內已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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