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上海紀寧酶聯科技有限公司
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鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
14039 表皮調節素(EREG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Epiregulin (EREG) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
14040 趨化因子C-C-基元受體1(CCR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 1 (CCR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14041 肝X受體α(LXRα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Liver X Receptor Alpha (LXRa) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
14042 翻譯調節腫瘤蛋白1(TPT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tumor Protein, Translationally Controlled 1 (TPT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14043 成纖維細胞生長因子9(FGF9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 9 (FGF9) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
14044 纖維膠凝蛋白1(FCN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ficolin 1 (FCN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
14045 整合素β6(ITGβ6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Beta 6 (ITGb6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14046 核糖核酸酶A(RNASE1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribonuclease A (RNASE1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
14047 脂肪酸合酶(FASN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fatty Acid Synthase (FASN) 48T/96T Chicken (Gallus)
14048 汗酸酶αL(IDUα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Iduronidase Alpha L (IDUa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14049 促凋亡蛋白1(APOPT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apoptogenic 1 (APOPT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14050 巖藻糖變旋酶(FucM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fucose Mutarotase (FucM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14051 Nesprin 4蛋白(Nesp4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nesprin 4 (Nesp4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14052 著絲粒蛋白32(CENP32)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Centromere Protein 32 (CENP32) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14053 癌/睪丸抗原62(CTAG62)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cancer/Testis Antigen 62 (CTAG62) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14054 Sugen激酶071(SGK071)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sugen Kinase 071 (SGK071) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14055 Ashwin蛋白(Ash)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ashwin (Ash) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14056 蛋白C10(C10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein C10 (C10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14057 B-黑色素瘤抗原5(BAGE5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for B-Melanoma Antigen 5 (BAGE5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14058 著絲粒蛋白36(CENP36)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Centromere Protein 36 (CENP36) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14059 可溶性半乳糖苷結合凝集素16(LGALS16)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lectin, Galactoside-Binding Soluble 16 (LGALS16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14060 內切核酸酶V(ENDOV)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Endonuclease V (ENDOV) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14061 Kazrin蛋白(KAZN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kazrin (KAZN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14062 前庭蛋白1(VEST1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vestibule 1 (VEST1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14063 殺傷蛋白(KLLN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Killin (KLLN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14064 *X3(TRYX3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Trypsin X3 (TRYX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14065 Whirlin蛋白(WHRN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Whirlin (WHRN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14066 皮卡丘素(Pikachurin)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pikachurin 48T/96T Homo sapiens (Human)
14067 血色病蛋白(HFE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hemochromatosis (HFE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14068 微腦磷脂1(MCPH1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Microcephalin 1 (MCPH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14069 腎病型胱胺酸癥蛋白(CTNS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cystinosis, Nephropathic (CTNS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14070 腦蛋白44(BRP44)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Brain Protein 44 (BRP44) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14071 Hairless蛋白(HR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hairless (HR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14072 載脂蛋白L6(APOL6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein L6 (APOL6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14073 Atonal同源物1(ATOH1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Atonal Homolog 1 (ATOH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14074 鈣黏蛋白12(CDH12)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cadherin 12 (CDH12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14075 矢車菊苷γ3(CENTγ3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Centaurin Gamma 3 (CENTg3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14076 矢車菊苷δ3(CENTδ3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Centaurin Delta 3 (CENTd3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14077 矢車菊苷δ2(CENTδ2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Centaurin Delta 2 (CENTd2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14078 矢車菊苷δ1(CENTδ1)鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Centaurin Delta 1 (CENTd1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14079 羧肽酶X1(CPX1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carboxypeptidase X1 (CPX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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