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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-26 09:54:27瀏覽次數(shù):426次
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鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
14082 防御素β118(DEFβ118)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Defensin Beta 118 (DEFb118) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14083 Derlin 1蛋白(DERL1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Derlin 1 (DERL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14084 Derlin 2蛋白(DERL2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Derlin 2 (DERL2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14085 Derlin 3蛋白(DERL3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Derlin 3 (DERL3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14086 白喉素合酶(DPH5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Diphthine Synthase (DPH5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14087 DR1關(guān)聯(lián)蛋白1(DRAP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for DR1 Associated Protein 1 (DRAP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14088 乙基丙二酸腦病變基因1(ETHE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ethylmalonic Encephalopathy 1 (ETHE1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14089 延長(zhǎng)蛋白4(ELP4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Elongation Protein 4 (ELP4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14090 延長(zhǎng)蛋白3(ELP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Elongation Protein 3 (ELP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14091 Myoferlin蛋白(MYOF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myoferlin (MYOF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14092 Kindlin 2蛋白(KIND2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Kindlin 2 (KIND2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14093 磷酸神經(jīng)膜蛋白(PLM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phospholemman (PLM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14094 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶1(GALNT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 1 (GALNT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14095 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶2(GALNT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 2 (GALNT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14096 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶3(GALNT3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 3 (GALNT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14097 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶4(GALNT4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 4 (GALNT4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14098 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶6(GALNT6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 6 (GALNT6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14099 腎胱素7(NPHP7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nephrocystin 7 (NPHP7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14100 顆粒酶H(GZMH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Granzyme H (GZMH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14101 Cupidin蛋白(CPD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cupidin (CPD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14102 Jagged 2蛋白(JAG2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Jagged 2 Protein (JAG2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14103 Laforin蛋白(LDE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Laforin (LDE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14104 Tricellulin蛋白(TRIC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tricellulin (TRIC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14105 Muskelin 1蛋白(MKLN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Muskelin 1 (MKLN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14106 黏病毒耐藥蛋白2(MX2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myxovirus Resistance 2 (MX2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14107 前-B-淋巴細(xì)胞基因3(VPREB3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Pre-B-Lymphocyte Gene 3 (VPREB3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14108 Vezatin蛋白(VEZT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vezatin (VEZT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14109 Otubain 1蛋白(OTUB1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Otubain 1 (OTUB1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14110 Otubain 2蛋白(OTUB2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Otubain 2 (OTUB2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14111 肌腱蛋白M(TNM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tenascin M (TNM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14112 肌腱蛋白M2(TENM2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tenascin M2 (TENM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14113 肌腱蛋白M3(TENM3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tenascin M3 (TENM3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14114 肌腱蛋白M4(TENM4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tenascin M4 (TENM4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14115 Nicalin蛋白(NCLN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nicalin (NCLN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14116 N-去乙酰化酶/磺基轉(zhuǎn)移酶1(NDST1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Deacetylase/N-Sulfotransferase 1 (NDST1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14117 N-去乙酰化酶/磺基轉(zhuǎn)移酶2(NDST2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Deacetylase/N-Sulfotransferase 2 (NDST2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14118 N-去乙酰化酶/磺基轉(zhuǎn)移酶3(NDST3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Deacetylase/N-Sulfotransferase 3 (NDST3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14119 信號(hào)素3D(SEMA3D)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Semaphorin 3D (SEMA3D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14120 信號(hào)素3B(SEMA3B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Semaphorin 3B (SEMA3B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14121 信號(hào)素4C(SEMA4C)檢測(cè)試劑盒鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Semaphorin 4C (SEMA4C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14122 信號(hào)素4F(SEMA4F)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Semaphorin 4F (SEMA4F) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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