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上海紀寧酶聯科技有限公司
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禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
14167 溶血磷脂酰乙醇胺酰基轉移酶1(LPEAT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysophosphatidylethanolamine Acyltransferase 1 (LPEAT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14168 溶血磷脂酰肌醇酰基轉移酶(LPIAT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysophosphatidylinositol Acyltransferase (LPIAT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14169 CREB/ATF BZIP轉錄因子(CREBZF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for CREB/ATF BZIP Transcription Factor (CREBZF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14170 外切酶體成分7(EXOSC7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Exosome Component 7 (EXOSC7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14171 外切酶體成分8(EXOSC8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Exosome Component 8 (EXOSC8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14172 外切酶體成分9(EXOSC9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Exosome Component 9 (EXOSC9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14173 外切酶體成分10(EXOSC10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Exosome Component 10 (EXOSC10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14174 外切酶體成分6(EXOSC6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Exosome Component 6 (EXOSC6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14175 自噬/芐氯素1調節因子1(AMBRA1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Autophagy/Beclin 1 Regulator 1 (AMBRA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14176 水通道蛋白10(AQP10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aquaporin 10 (AQP10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14177 水通道蛋白11(AQP11)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aquaporin 11 (AQP11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14178 水通道蛋白12(AQP12)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aquaporin 12 (AQP12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14179 Megane蛋白(Mgn)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Megane (Mgn) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14180 TLX1鄰位子(TLX1NB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for TLX1 Neighbor (TLX1NB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14181 Synleurin蛋白(SLRN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synleurin (SLRN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14182 紡錘體蛋白2B(SPIN2B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Spindlin 2B (SPIN2B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14183 釉成熟蛋白(AMTN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amelotin (AMTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14184 葡萄糖苷木糖基轉移酶2(GXYLT2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glucoside Xylosyltransferase 2 (GXYLT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14185 牙骨質蛋白1(CEMP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cementum Protein 1 (CEMP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14186 Lebercilin蛋白(LCA5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lebercilin (LCA5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14187 N-乙酰轉移酶8B(NAT8B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 8B (NAT8B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14188 甲狀旁腺激素2(PTH2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Parathyroid Hormone 2 (PTH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14189 G抗原10(GAGE10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for G Antigen 10 (GAGE10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14190 Cytospin A蛋白(CYTSA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytospin A (CYTSA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14191 G抗原13(GAGE13)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for G Antigen 13 (GAGE13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14192 端粒酶延長分子2(O2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for omere Maintenance 2 (O2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14193 Juxtanodin蛋白(JN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Juxtanodin (JN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14194 Shootin 1蛋白(Shootin1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Shootin 1 48T/96T Homo sapiens (Human)
14195 蛋白磷酸酶1調節因子亞基18(PPP1R18)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Phosphatase 1, Regulatory Subunit 18 (PPP1R18) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14196 環指CCCH-型鋅指蛋白域蛋白1(RC3H1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ring Finger And CCCH-Type Zinc Finger Domains Protein 1 (RC3H1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14197 常染色體隱性遺傳性耳聾59蛋白(DFNB59)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Deafness, Autosomal Recessive 59 (DFNB59) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14198 含RUN域半*豐富域芐氯素1相互作用蛋白(Rubicon)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for RUN Domain And Cysteine Rich Domain Containing, Beclin 1 Interacting Protein (Rubicon) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14199 Strumpellin蛋白(STRUM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Strumpellin (STRUM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14200 Malectin蛋白(MLEC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Malectin (MLEC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14201 N-乙酰轉移酶14(NAT14)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 14 (NAT14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14202 TOPBP1相互作用復制刺激蛋白(Treslin)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for TOPBP1 Interacting Replication Stimulating Protein (Treslin) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14203 減數分裂抑制因子1(MEI1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Meiosis Inhibitor 1 (MEI1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14204 Pianissimo蛋白(PIA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pianissimo (PIA) 48T/96T Homo sapiens禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒 (Human)
14205 Enkurin蛋白(ENKUR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Enkurin (ENKUR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14206 *磷酸核糖轉移酶(UPRT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Uracil Phosphoribosyltransferase (UPRT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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