禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

14167 溶血磷脂酰乙醇胺酰基轉(zhuǎn)移酶1(LPEAT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lysophosphatidylethanolamine Acyltransferase 1 (LPEAT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14168 溶血磷脂酰肌醇酰基轉(zhuǎn)移酶(LPIAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lysophosphatidylinositol Acyltransferase (LPIAT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14169 CREB/ATF BZIP轉(zhuǎn)錄因子(CREBZF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for CREB/ATF BZIP Transcription Factor (CREBZF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14170 外切酶體成分7(EXOSC7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Exosome Component 7 (EXOSC7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14171 外切酶體成分8(EXOSC8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Exosome Component 8 (EXOSC8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14172 外切酶體成分9(EXOSC9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Exosome Component 9 (EXOSC9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14173 外切酶體成分10(EXOSC10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Exosome Component 10 (EXOSC10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14174 外切酶體成分6(EXOSC6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Exosome Component 6 (EXOSC6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14175 自噬/芐氯素1調(diào)節(jié)因子1(AMBRA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Autophagy/Beclin 1 Regulator 1 (AMBRA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14176 水通道蛋白10(AQP10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aquaporin 10 (AQP10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14177 水通道蛋白11(AQP11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aquaporin 11 (AQP11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14178 水通道蛋白12(AQP12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aquaporin 12 (AQP12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14179 Megane蛋白(Mgn)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Megane (Mgn) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14180 TLX1鄰位子(TLX1NB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for TLX1 Neighbor (TLX1NB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14181 Synleurin蛋白(SLRN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Synleurin (SLRN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14182 紡錘體蛋白2B(SPIN2B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Spindlin 2B (SPIN2B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14183 釉成熟蛋白(AMTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Amelotin (AMTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14184 葡萄糖苷木糖基轉(zhuǎn)移酶2(GXYLT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glucoside Xylosyltransferase 2 (GXYLT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14185 牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cementum Protein 1 (CEMP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14186 Lebercilin蛋白(LCA5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lebercilin (LCA5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14187 N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8B(NAT8B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 8B (NAT8B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14188 甲狀旁腺激素2(PTH2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Parathyroid Hormone 2 (PTH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14189 G抗原10(GAGE10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for G Antigen 10 (GAGE10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14190 Cytospin A蛋白(CYTSA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cytospin A (CYTSA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14191 G抗原13(GAGE13)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for G Antigen 13 (GAGE13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14192 端粒酶延長分子2(O2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for omere Maintenance 2 (O2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14193 Juxtanodin蛋白(JN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Juxtanodin (JN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14194 Shootin 1蛋白(Shootin1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Shootin 1 48T/96T Homo sapiens (Human)
14195 蛋白磷酸酶1調(diào)節(jié)因子亞基18(PPP1R18)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Phosphatase 1, Regulatory Subunit 18 (PPP1R18) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14196 環(huán)指CCCH-型鋅指蛋白域蛋白1(RC3H1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ring Finger And CCCH-Type Zinc Finger Domains Protein 1 (RC3H1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14197 常染色體隱性遺傳性耳聾59蛋白(DFNB59)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Deafness, Autosomal Recessive 59 (DFNB59) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14198 含RUN域半*豐富域芐氯素1相互作用蛋白(Rubicon)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for RUN Domain And Cysteine Rich Domain Containing, Beclin 1 Interacting Protein (Rubicon) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14199 Strumpellin蛋白(STRUM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Strumpellin (STRUM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14200 Malectin蛋白(MLEC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Malectin (MLEC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14201 N-乙酰轉(zhuǎn)移酶14(NAT14)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 14 (NAT14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14202 TOPBP1相互作用復(fù)制刺激蛋白(Treslin)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for TOPBP1 Interacting Replication Stimulating Protein (Treslin) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14203 減數(shù)分裂抑制因子1(MEI1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Meiosis Inhibitor 1 (MEI1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14204 Pianissimo蛋白(PIA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Pianissimo (PIA) 48T/96T Homo sapiens禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒 (Human)
14205 Enkurin蛋白(ENKUR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Enkurin (ENKUR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14206 *磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(UPRT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Uracil Phosphoribosyltransferase (UPRT) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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