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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-28 23:18:09瀏覽次數(shù):529次
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毒蛇因子(CVF) ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
毒蛇因子(CVF) ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在毒蛇因子(CVF) ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
14209 含F(xiàn)YVE域鋅指蛋白27(ZFYVE27)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Zinc Finger, FYVE Domain Containing Protein 27 (ZFYVE27) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14210 驅(qū)動結合蛋白(KNCN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kinocilin (KNCN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14211 Consortin蛋白(CNST)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Consortin (CNST) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14212 Protogenin蛋白(PRTG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protogenin (PRTG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14213 Tectonic 1蛋白(TCTN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tectonic 1 (TCTN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14214 PTB結合核蛋白2(RAVER2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribonucleoprotein, PTB Binding 2 (RAVER2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14215 Girdin蛋白(GRDN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Girdin (GRDN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14216 Erlectin 1蛋白(ERLEC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Erlectin 1 (ERLEC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14217 Dermokine蛋白(DMKN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dermokine (DMKN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14218 Genethonin 1蛋白(GEN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Genethonin 1 (GEN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14219 TBC1域家族成員10C(TBC1D10C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for TBC1 Domain Family, Member 10C (TBC1D10C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14220 烯醇化酶磷酸酶1(ENOPH1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Enolase Phosphatase 1 (ENOPH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14221 Hyccin蛋白(HCC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hyccin (HCC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14222 Dendrin蛋白(DDN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dendrin (DDN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14223 N-α-乙酰轉移酶25(NαA25)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Alpha-Acetyltransferase 25 (NAA25) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14224 甘油酸激酶(GLYCTK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glycerate Kinase (GLYCTK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14225 Recepin蛋白(CIR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Recepin (CIR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14226 Reprimo蛋白(RPRM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Reprimo (RPRM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14227 天冬氨酸酰酶3(ACY3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aspartoacylase 3 (ACY3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14228 Archease蛋白(ARCH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Archease (ARCH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14229 肌動絲蛋白(AF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Actinfilin (AF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14230 Spatial蛋白(C10ORF27)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Spatial (C10ORF27) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14231 唾液酸轉移酶7F(SIAT7F)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sialyltransferase 7F (SIAT7F) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14232 唾液酸轉移酶8F(SIAT8F)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sialyltransferase 8F (SIAT8F) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14233 Dystroin蛋白(DYTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dystroin (DYTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14234 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉移酶13(GALNT13)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 13 (GALNT13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14235 Isthmin 2蛋白(ISM2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Isthmin 2 (ISM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14236 葡萄糖磷酸變位酶2樣蛋白1(PGM2L1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphoglucomutase 2 Like Protein 1 (PGM2L1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14237 含F(xiàn)YVE域鋅指蛋白26(ZFYVE26)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Zinc Finger, FYVE Domain Containing Protein 26 (ZFYVE26) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14238 含F(xiàn)YVE域鋅指蛋白16(ZFYVE16)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Zinc Finger, FYVE Domain Containing Protein 16 (ZFYVE16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14239 N-α-乙酰轉移酶38(NαA38)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Alpha-Acetyltransferase 38 (NAA38) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14240 Neuroguidin蛋白(NGDN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuroguidin (NGDN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14241 Kintoun蛋白(KTU)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kintoun (KTU) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14242 AHNAK核蛋白2(AHNAK2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for AHNAK Nucleoprotein 2 (AHNAK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14243 Rho蛋白1(RHPN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Rhophilin 1 (RHPN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14244 芐氯素1關聯(lián)自噬相關關鍵調(diào)節(jié)因子(Barkor)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Beclin-1-Associated Autophagy Related Key Regulator (Barkor) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14245 Talpid 3蛋白(Talpid3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Talpid 3 (Talpid3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14246 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉移酶12(GALNT12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 12 (GALNT12) 48T/96T Homo sapiens毒蛇因子(CVF) ELISA試劑盒 (Human)
14247 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉移酶10(GALNT10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 10 (GALNT10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5毒蛇因子(CVF) ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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