人抗核抗體(ANA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)室
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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花生凝集素(PNA)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
花生凝集素(PNA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在花生凝集素(PNA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
15394 黑素皮質(zhì)激素4受體(MC4R)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Melanocortin 4 Receptor (MC4R) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15395 黑素皮質(zhì)激素5受體(MC5R)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Melanocortin 5 Receptor (MC5R) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15396 神經(jīng)元導(dǎo)向因子3(NAV3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neuron Navigator 3 (NAV3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15397 神經(jīng)元導(dǎo)向因子2(NAV2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neuron Navigator 2 (NAV2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15398 溶血磷脂酶Ⅲ(LYPLA3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lysophospholipase III (LYPLA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15399 Piccolo蛋白(PCLO)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Piccolo (PCLO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15400 腎胱素5(NPHP5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nephrocystin 5 (NPHP5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15401 磷酸二酯酶7A(PDE7A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phosphodiesterase 7A (PDE7A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15402 磷酸二酯酶8A(PDE8A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phosphodiesterase 8A (PDE8A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15403 磷酸二酯酶8B(PDE8B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phosphodiesterase 8B (PDE8B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15404 磷酸二酯酶9A(PDE9A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phosphodiesterase 9A (PDE9A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15405 磷酸二酯酶10A(PDE10A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phosphodiesterase 10A (PDE10A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15406 磷酸二酯酶11A(PDE11A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phosphodiesterase 11A (PDE11A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15407 磷酸二酯酶12(PDE12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phosphodiesterase 12 (PDE12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15408 甘油磷酸二酯磷酸二酯酶1(GDE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glycerophosphodiester Phosphodiesterase 1 (GDE1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15409 Nebulette蛋白(NEBL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nebulette (NEBL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15410 神經(jīng)連接蛋白3(NLGN3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neuroligin 3 (NLGN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15411 神經(jīng)連接蛋白2(NLGN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neuroligin 2 (NLGN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15412 N-肉豆蔻酰基轉(zhuǎn)移酶1(NMT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Myristoyltransferase 1 (NMT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15413 核仁蛋白4(NOL4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleolar Protein 4 (NOL4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15414 核仁蛋白3(NOL3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleolar Protein 3 (NOL3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15415 核仁蛋白6(NOL6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleolar Protein 6 (NOL6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15416 核仁蛋白7(NOL7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleolar Protein 7 (NOL7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15417 核仁蛋白8(NOL8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleolar Protein 8 (NOL8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15418 腎結(jié)核蛋白4(NPHP4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nephronophthisis 4 (NPHP4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15419 核仁磷酸蛋白2(NPM2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleophosmin 2 (NPM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15420 核仁磷酸蛋白3(NPM3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleophosmin 3 (NPM3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15421 軸突蛋白2(NRXN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neurexin 2 (NRXN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15422 軸突蛋白3(NRXN3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neurexin 3 (NRXN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15423 神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白2(NXPH2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neurexophilin 2 (NXPH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15424 神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白3(NXPH3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neurexophilin 3 (NXPH3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15425 神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白4(NXPH4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neurexophilin 4 (NXPH4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15426 泛酸激酶2(PANK2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Pantothenate Kinase 2 (PANK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15427 泛酸激酶3(PANK3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Pantothenate Kinase 3 (PANK3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15428 泛酸激酶4(PANK4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Pantothenate Kinase 4 (PANK4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15429 葡萄糖磷酸變位酶5(PGM5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phosphoglucomutase 5 (PGM5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15430 磷酸甘露糖酶1花生凝集素(PNA)ELISA試劑盒(PMM2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phosphomannomutase 2 (PMM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15431 蛋白O-甘露糖基轉(zhuǎn)移酶2(POMT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein O-Mannosyltransferase 2 (POMT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5花生凝集素(PNA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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