鹿胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在鹿胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

16197 成纖維細胞生長因子8(FGF8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 8, Androgen Induced (FGF8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16198 阿米洛利敏感鈉離子通道蛋白1γ(SCNN1γ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amiloride Sensitive Sodium Channel Subunit Gamma (SCNN1g) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16199 阿米洛利敏感鈉離子通道蛋白1β(SCNN1β)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amiloride Sensitive Sodium Channel Subunit Beta (SCNN1b) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16200 動力蛋白軸絲重鏈11(DNAH11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dynein, Axonemal, Heavy Chain 11 (DNAH11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16201 解整合素金屬蛋白酶17(ADAM17)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 17 (ADAM17) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16202 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白8(LRP8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 8 (LRP8) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16203 Disabled同源物1(DAB1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Disabled Homolog 1 (DAB1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16204 整合素β3(ITGβ3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Integrin Beta 3 (ITGb3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16205 腫瘤壞死因子受體超家族成員1B(TNFRSF1B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1B (TNFRSF1B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16206 二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dihydroorotate Dehydrogenase (DHODH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16207 蛋白L-異天冬氨酸-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(PCMT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein L-Isoaspartate-O-Methyltransferase (PCMT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16208 補體成分5a受體1(C5aR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Component 5a Receptor 1 (C5aR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16209 突觸融合蛋白1A(STX1A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntaxin 1A, Brain (STX1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16210 動力蛋白胞漿1重鏈1(DYNC1H1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dynein, Cytoplasmic 1, Heavy Chain 1 (DYNC1H1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16211 皮屑蛋白樣蛋白1(LEPREL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Leprecan Like Protein 1 (LEPREL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16212 葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glucose 6 Phosphate Isomerase (GPI) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16213 細胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Suppressors Of Cytokine Signaling 3 (SOCS3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16214 神經(jīng)蛋白聚糖(NCAN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neurocan (NCAN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16215 接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白2(CNTNAP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Contactin Associated Protein Like Protein 2 (CNTNAP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16216 溶質(zhì)載體家族39成員6(SLC39A6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 39, Member 6 (SLC39A6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16217 細胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子2(SOCS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Suppressors Of Cytokine Signaling 2 (SOCS2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16218 細胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Suppressors Of Cytokine Signaling 1 (SOCS1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16219 磷酸甘油酸變位酶1(PGAM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphoglycerate Mutase 1, Brain (PGAM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16220 成纖維細胞生長因子19(FGF19)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 19 (FGF19) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16221 90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Alpha A1 (HSP90aA1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16222 CD160分子(CD160)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 160 (CD160) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16223 色素上皮衍生因子(PEDF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pigment Epithelium Derived Factor (PEDF) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
16224 促腎上腺皮質(zhì)激素樣中葉肽(CLIP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Corticotropin Like Intermediate Lobe Peptide (CLIP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16225 白介素1受體關(guān)聯(lián)激酶4(IRAK4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 4 (IRAK4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16226 神經(jīng)肽S受體(NPSR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuropeptide S Receptor (NPSR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16227 ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白C6(ABCC6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ATP Binding Cassette Transporter C6 (ABCC6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16228 ADP核糖轉(zhuǎn)移酶1(ART1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ADP Ribosyltransferase 1 (ART1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16229 Mdm2 p53結(jié)合蛋白同源物(MDM2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mdm2 p53 Binding Protein Homolog (MDM2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16230 錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ankyrin Repeat Domain Protein 1 (ANKRD1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16231 無翅型MMTV整合位點家族成員3(WNT3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3 (WNT3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16232 血管內(nèi)皮生長因子145(VEGF145)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor 145 (VEGF145) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16233 纖連蛋白(FN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibronectin (FN) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
16234 纖連蛋白(FN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibronectin (FN) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
16235 白介素8(IL8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
16236 免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin M (IgM) 48T/96T Bos taurus; Bovine鹿胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒 (Cattle)
16237 免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin M (IgM) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16238 免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5鹿胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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