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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
16451 血管緊張素1-7(Ang1-7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiotensin 1-7 (Ang1-7) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
16452 11-β-羥基類固醇脫氫酶3(HSD11β3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD11b3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16453 腎腫瘤抗原(RAGE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Renal Tumor Antigen (RAGE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16454 趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Ligand 1 (CCL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16455 腫瘤壞死因子受體超家族成員1A(TNFRSF1A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1A (TNFRSF1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16456 巨噬細胞炎性蛋白4α(MIP4α)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 4 Alpha (MIP4a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16457 碳酸酐酶Ⅸ(CA9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carbonic Anhydrase IX (CA9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16458 生長調節致癌基因β(GROβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Regulated Oncogene Beta (GROb) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16459 Dickkopf相關蛋白1(DKK1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dickkopf Related Protein 1 (DKK1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16460 趨化素(CHEM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chemerin (CHEM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16461 生長調節致癌基因γ(GROγ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Regulated Oncogene Gamma (GROg) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16462 單核細胞趨化蛋白5(MCP5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 5 (MCP5) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16463 乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Milk Fat Globule EGF Factor 8 (MFGE8) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16464 腫瘤壞死因子受體超家族成員5(TNFRSF5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 5 (TNFRSF5) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16465 白蛋白(ALB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Albumin (ALB) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
16466 *受體(VDR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vitamin D Receptor (VDR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16467 褪黑素受體1A(MTNR1A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Melatonin Receptor 1A (MTNR1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16468 鈉/鉀離子轉運ATP酶β3肽(ATP1β3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 3 Polypeptide (ATP1b3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16469 結合珠蛋白(Hpt)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Haptoglobin (Hpt) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
16470 胎盤鈣黏蛋白(CDHP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cadherin, Placental (CDHP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16471 *半*連接酶(GCLM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit (GCLM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16472 抗利尿激素(ADH)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16473 β-1,3-葡糖醛酸基移酶1(β3GAT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Beta-1,3-Glucuronyltransferase 1 (b3GAT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16474 核因子κB抑制因子α(IκBα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inhibitory Subunit Of NF Kappa B Alpha (IkBa) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16475 轉鐵蛋白(TRF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transferrin (TRF) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
16476 過氧化還原酶1(PRDX1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peroxiredoxin 1 (PRDX1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16477 端粒重復結合因子1(TERF1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for omeric Repeat Binding Factor 1 (TERF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16478 血小板衍生生長因子B(PDGFB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor Subunit B (PDGFB) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16479 核連蛋白1(NUCB1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleobindin 1 (NUCB1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16480 褪黑素受體1B(MTNR1B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Melatonin Receptor 1B (MTNR1B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16481 松弛素/胰島素樣肽受體3(RXFP3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 3 (RXFP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16482 RAR相關孤兒素受體γ(RORγ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for RAR Related Orphan Receptor Gamma (RORg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16483 溶質載體家族16成員3(SLC16A3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 16, Member 3 (SLC16A3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16484 溶質載體家族30成員1(SLC30A1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 1 (SLC30A1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16485 溶質載體家族30成員4(SLC30A4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 30 Member 4 (SLC30A4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16486 溶質載體家族30成員7(SLC30A7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 30 Member 7 (SLC30A7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16487 鞘氨醇1磷酸酯裂解酶人轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒1(SGPL1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sphingosine 1 Phosphate Lyase 1 (SGPL1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16488 11-β-羥基類固醇脫氫酶2(HSD11β2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 2 (HSD11b2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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