人白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

16489 L-型電壓依賴鈣離子通道α1S亞基(CACNα1S)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, L-Type, Alpha 1S Subunit (CACNa1S) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16490 L-型電壓依賴鈣離子通道α1C亞基(CACNα1C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, L-Type, Alpha 1C Subunit (CACNa1C) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16491 L-型電壓依賴性鈣離子通道α1D亞基(CACNα1D)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, L-Type, Alpha 1D Subunit (CACNa1D) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16492 L-型電壓依賴鈣離子通道α1F亞基(CACNα1F)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, L-Type, Alpha 1F Subunit (CACNa1F) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16493 N-型電壓依賴鈣離子通道α1B亞基(CACNα1B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, N-Type, Alpha 1B Subunit (CACNa1B) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16494 R-型電壓依賴鈣離子通道α1E亞基(CACNα1E)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, R-Type, Alpha 1E Subunit (CACNa1E) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16495 T-型電壓依賴鈣離子通道α1H亞基(CACNα1H)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, T-Type, Alpha 1H Subunit (CACNa1H) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16496 端粒重復(fù)結(jié)合因子2(TERF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for omeric Repeat Binding Factor 2 (TERF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16497 過氧化還原酶6(PRDX6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peroxiredoxin 6 (PRDX6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16498 鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運ATP酶α1肽(ATP1α1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ATPase, Na+/K+ Transporting Alpha 1 Polypeptide (ATP1a1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16499 鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運ATP酶β1肽(ATP1β1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 1 Polypeptide (ATP1b1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16500 溶質(zhì)載體家族30成員3(SLC30A3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 3 (SLC30A3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16501 溶質(zhì)載體家族30成員5(SLC30A5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 5 (SLC30A5) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16502 溶質(zhì)載體家族30成員6(SLC30A6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 6 (SLC30A6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16503 肝細(xì)胞核因子1β(HNF1β)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hepatocyte Nuclear Factor 1 Beta (HNF1b) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16504 丙糖磷酸異構(gòu)酶1(TPI1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Triosephosphate Isomerase 1 (TPI1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16505 墨蝶呤還原酶(SPR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sepiapterin Reductase (SPR) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16506 *豐富重復(fù)FLII相互作用蛋白1(LRRFIP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Leucine Rich Repeat In FLII Interacting Protein 1 (LRRFIP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16507 端粒保護(hù)1同源物(POT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protection Of omeres 1 Homolog (POT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16508 含*豐富重復(fù)蛋白3C(LRRC3C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Leucine Rich Repeat Containing Protein 3C (LRRC3C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16509 FK506結(jié)合蛋白樣蛋白(FKBPL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for FK506 Binding Protein Like Protein (FKBPL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16510 無翅型MMTV整合位點家族成員4(WNT4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 4 (WNT4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16511 含RCC1和BTB域蛋白2(RCBTB2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for RCC1 And BTB Domain Containing Protein 2 (RCBTB2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16512 類固醇5α還原酶2(SRD5α2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Steroid 5 Alpha Reductase 2 (SRD5a2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16513 含SET域蛋白7(SETD7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for SET Domain Containing Protein 7 (SETD7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16514 赫曼斯基普德拉克綜合征蛋白6(HPS6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hermansky Pudlak Syndrome Protein 6 (HPS6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16515 *蛋白酶50(PRSS50)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protease, Serine 50 (PRSS50) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16516 含Toll白細(xì)胞介素1受體域銜接蛋白(TIRAP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Toll Interleukin 1 Receptor Domain Containing Adaptor Protein (TIRAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16517 肌球蛋白重鏈7B(MYH7B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 7B, Cardiac Muscle Beta (MYH7B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16518 無翅型MMTV整合位點家族成員9B(WNT9B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 9B (WNT9B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16519 T-框蛋白21(TBX21)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for T-Box Protein 21 (TBX21) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16520 粘蛋白12(MUC12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mucin 12, Cell Surface Associated (MUC12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16521 鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運ATP酶β4肽(ATP1β4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 4 Polypeptide (ATP1b4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16522 棘皮動物微管關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白2(EML2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Echinoderm Microtubule Associated Protein Like Protein 2 (EML2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16523 胎盤特異性蛋白9(PLAC9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Placenta Specific Protein 9 (PLAC9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16524 短腭肺鼻腔上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白2(SPLUNC2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Short Palate, Lung And Nasal Epithelium Carcinoma Associated Protein 2 (SPLUNC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16525 短腭肺鼻腔上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白3(SPLUNC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Short Palate, Lung And Nasal Epithelium Carcinoma Associated Protein 3 (SPLUNC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16526 抑制素βC(INHβC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inhibin Beta C (INHbC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16527 銅伴侶超氧化物歧化酶(SOD4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Superoxide Dismutase, Copper Chaperone (SOD4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16528 胱天蛋白酶3(CASP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Caspase 3 (CASP3) 48T/96T Bos taurus;人白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒 Bovine (Cattle)
16529 補體受體2(CR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Receptor 2 (CR2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16530 細(xì)胞程序性死亡蛋白1(PDCD1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Programmed Cell Death Protein 1 (PDCD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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