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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人B細胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人B細胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人B細胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
16695 S100鈣結合蛋白A4(S100A4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A4 (S100A4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16696 泛素結合酶E2C結合蛋白E2L3(UBE2L3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2L3 (UBE2L3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16697 法尼酯X受體(FXR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Farnesoid X Receptor (FXR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16698 鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶1(SGPP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sphingosine-1-Phosphate Phosphatase 1 (SGPP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16699 Ⅵ型膠原α1(COL6α1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Type VI Alpha 1 (COL6a1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16700 神經調節素2(NRG2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuregulin 2 (NRG2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16701 小異二聚體伴侶(SHP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Small Heterodimer Partner (SHP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16702 吲哚胺2,3-雙加氧酶2(IDO2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Indoleamine-2,3-Dioxygenase 2 (IDO2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16703 丁酰*酯酶(BCHE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Butyrylcholinesterase (BCHE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16704 甲基CpG結合蛋白2(MECP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Methyl CpG Binding Protein 2 (MECP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16705 興奮性氨基酸轉運蛋白3(EAAT3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Excitatory Amino Acid Transporter 3 (EAAT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16706 蘭尼定受體1(RYR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ryanodine Receptor 1, Skeletal (RYR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16707 Smoothelin蛋白(SMTN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Smoothelin (SMTN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16708 死亡誘導終結因子1(DIDO1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Death Inducer Obliterator 1 (DIDO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16709 死亡誘導終結因子1(DIDO1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Death Inducer Obliterator 1 (DIDO1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16710 成纖維細胞生長因子17(FGF17)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 17 (FGF17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16711 鈣蛋白酶10(CAPN10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calpain 10 (CAPN10) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16712 Apelin蛋白(APLN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apelin (APLN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16713 VI型膠原(COL6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Type VI (COL6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16714 肌球蛋白重鏈11(MYH11)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 11, Smooth Muscle (MYH11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16715 蛋白*磷酸酶樣蛋白A(PTPLA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase Like Protein A (PTPLA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16716 非受體型蛋白*磷酸酶6(PTPN6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase, Non Receptor Type 6 (PTPN6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16717 細胞色素P450家族成員27B1(CYP27B1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytochrome P450 27B1 (CYP27B1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16718 維甲酸受體β(RARβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Retinoic Acid Receptor Beta (RARb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16719 維甲酸受體γ(RARγ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Retinoic Acid Receptor Gamma (RARg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16720 肝受體同源物1(LRH1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Liver Receptor Homolog 1 (LRH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16721 肝受體同源物1(LRH1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Liver Receptor Homolog 1 (LRH1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16722 囊泡單胺轉運蛋白2(VMAT2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vesicular Monoamine Transporter 2 (VMAT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16723 陽離子氨基酸轉運蛋白2(CAT2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cationic Amino Acid Transporter 2 (CAT2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16724 N-酰基乙醇胺酸酰化酶(NAAA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Acylethanolamine Acid Amidase (NAAA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16725 真核翻譯起始因子4A2(EIF4A2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Eukaryotic Translation Initiation Factor 4A2 (EIF4A2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16726 DNA指導聚合酶γ1(POLγ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Polymerase DNA Directed Gamma 1 (POLg1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16727 腺苷A2b受體(ADORA2b)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adenosine A2b Receptor (ADORA2b) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16728 磷脂酰肌醇結合網格蛋白裝配蛋白(PICALM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphatidylinositol Binding Clathrin Assembly Protein (PICALM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16729 氧化應激誘導生長抑制因子1(OSGIN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Oxidative Stress Induced Growth Inhibitor 1 (OSGIN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16730 B-Raf原癌基因*/*蛋白激酶(BRAF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for B-Raf Proto Oncogene Serine/Threonine Protein Kinase (BRAF) 48T/96T Homo sapiens人B細胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒 (Human)
16731 內質網氨肽酶2(ERAP2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Endoplasmic Reticulum Aminopeptidase 2 (ERAP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16732 *脫氫酶(GLDC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glycine Dehydrogenase (GLDC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人B細胞分化因子(BCDF)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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