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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
17300 基質細胞衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Stromal Cell Derived Factor 2 Like Protein 1 (SDF2L1) 96T Homo sapiens (Human)
17301 基質細胞衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Stromal Cell Derived Factor 2 Like Protein 1 (SDF2L1) 96T Mus musculus (Mouse)
17302 基質細胞衍生因子2樣蛋白1(SDF2L1)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Stromal Cell Derived Factor 2 Like Protein 1 (SDF2L1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17303 滑行蛋白β(TXLNβ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Taxilin Beta (TXLNb) 96T Homo sapiens (Human)
17304 滑行蛋白β(TXLNβ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Taxilin Beta (TXLNb) 96T Mus musculus (Mouse)
17305 滑行蛋白β(TXLNβ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Taxilin Beta (TXLNb) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17306 早期B-細胞因子3(EBF3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Early B-Cell Factor 3 (EBF3) 96T Homo sapiens (Human)
17307 早期B-細胞因子3(EBF3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Early B-Cell Factor 3 (EBF3) 96T Mus musculus (Mouse)
17308 早期B-細胞因子3(EBF3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Early B-Cell Factor 3 (EBF3) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17309 早期B-細胞因子4(EBF4)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Early B-Cell Factor 4 (EBF4) 96T Homo sapiens (Human)
17310 早期B-細胞因子4(EBF4)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Early B-Cell Factor 4 (EBF4) 96T Mus musculus (Mouse)
17311 早期B-細胞因子4(EBF4)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Early B-Cell Factor 4 (EBF4) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17312 成纖維生長因子受體底物3(FRS3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 3 (FRS3) 96T Homo sapiens (Human)
17313 成纖維生長因子受體底物3(FRS3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 3 (FRS3) 96T Mus musculus (Mouse)
17314 成纖維生長因子受體底物3(FRS3)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 3 (FRS3) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17315 白介素1ζ(IL1ζ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Zeta (IL1z) 96T Homo sapiens (Human)
17316 白介素1ε(IL1ε)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Epsilon (IL1e) 96T Homo sapiens (Human)
17317 白介素1ε(IL1ε)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Epsilon (IL1e) 96T Mus musculus (Mouse)
17318 白介素1ε(IL1ε)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Epsilon (IL1e) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17319 生長因子受體結合蛋白10(Grb10)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 10 (Grb10) 96T Homo sapiens (Human)
17320 生長因子受體結合蛋白10(Grb10)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 10 (Grb10) 96T Mus musculus (Mouse)
17321 生長因子受體結合蛋白10(Grb10)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 10 (Grb10) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17322 生長因子受體結合蛋白14(Grb14)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 14 (Grb14) 96T Homo sapiens (Human)
17323 生長因子受體結合蛋白14(Grb14)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 14 (Grb14) 96T Mus musculus (Mouse)
17324 生長因子受體結合蛋白14(Grb14)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 14 (Grb14) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17325 生長因子受體結合蛋白7(Grb7)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 7 (Grb7) 96T Homo sapiens (Human)
17326 生長因子受體結合蛋白7(Grb7)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 7 (Grb7) 96T Mus musculus (Mouse)
17327 生長因子受體結合蛋白7(Grb7)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 7 (Grb7) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17328 基質金屬蛋白酶13(MMP13)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
17329 基質金屬蛋白酶13(MMP13)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 96T Canis familiaris; Canine (Dog)
17330 基質金屬蛋白酶13(MMP13)人可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 96T Capra hircus; Caprine (Goat)
17331 基質金屬蛋白酶13(MMP13)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) CLIA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 96T Equus caballus; Equine (Horse)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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