人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

17808 VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 96T Homo sapiens (Human)
17809 VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 96T Mus musculus (Mouse)
17810 VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17811 白細(xì)胞介素24(IL24)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 24 (IL24) 96T Homo sapiens (Human)
17812 白細(xì)胞介素24(IL24)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 24 (IL24) 96T Mus musculus (Mouse)
17813 白細(xì)胞介素24(IL24)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 24 (IL24) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17814 白介素20(IL20)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 20 (IL20) 96T Homo sapiens (Human)
17815 白介素29(IL29)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 29 (IL29) 96T Homo sapiens (Human)
17816 白介素22(IL22)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 22 (IL22) 96T Homo sapiens (Human)
17817 白介素22(IL22)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 22 (IL22) 96T Mus musculus (Mouse)
17818 生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15) 96T Homo sapiens (Human)
17819 生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15) 96T Mus musculus (Mouse)
17820 生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17821 ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白B10(ABCB10)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for ATP Binding Cassette Transporter B10 (ABCB10) 96T Homo sapiens (Human)
17822 S100鈣結(jié)合蛋白(S100)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for S100 Calcium Binding Protein (S100) 96T Homo sapiens (Human)
17823 S100鈣結(jié)合蛋白B(S100B)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for S100 Calcium Binding Protein B (S100B) 96T Homo sapiens (Human)
17824 硫氧化還原蛋白(Trx)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Thioredoxin (Trx) 96T Homo sapiens (Human)
17825 *原片段F1+2(F1+2)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Prothrombin Fragment 1+2 (F1+2) 96T Homo sapiens (Human)
17826 *Ⅹ(F10)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Coagulation Factor X (F10) 96T Homo sapiens (Human)
17827 蛋白酶激活受體2(PAR2)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Protease Activated Receptor 2 (PAR2) 96T Homo sapiens (Human)
17828 血清淀粉樣蛋白A(SAA)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Serum Amyloid A (SAA) 96T Homo sapiens (Human)
17829 非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Enolase, Non Neuronal (NNE) 96T Homo sapiens (Human)
17830 腦型肌酸激酶(CKB)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Creatine Kinase, Brain (CKB) 96T Homo sapiens (Human)
17831 磷脂酶D(PLD)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Phospholipase D (PLD) 96T Homo sapiens (Human)
17832 組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
17833 組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Homo sapiens (Human)
17834 組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Mus musculus (Mouse)
17835 組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
17836 組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17837 組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 96T Oryctolagus cuniculus人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒 (Rabbit)
17838 賴氨酰氧化酶(LOX)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Lysyl Oxidase (LOX) 96T Rattus norvegicus (Rat)

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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