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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人白介素6(IL-6)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人白介素6(IL-6)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人白介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
18077 Alpha2-AP (Rabbit Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit 兔子α2抗纖溶酶 96T
18078 RV IgM 風疹胞病毒 IgM(捕獲法二步法)
18079 TOXO IgG 弓形蟲抗體 IgG(間接法二步法)
18080 TOXO IgM 弓形蟲抗體 IgM(間接法二步法)
18081 TOXO IgM 弓形蟲抗體 IgM(捕獲法一步法)
18082 TOXO IgM 弓形蟲抗體 IgM(捕獲法二步法)
18083 HSV- I IgG 單純皰疹Ⅰ型病毒 IgG(間接法二步法)
18084 HSV- I IgM 單純皰疹Ⅰ型病毒 IgM(間接法二步法)
18085 HSV- I IgM 單純皰疹Ⅰ型病毒 IgM(捕獲法一步法)
18086 HSV- I IgM 單純皰疹Ⅰ型病毒 IgM(捕獲法二步法)
18087 HSV- II IgG 單純皰疹Ⅱ型病毒 IgG(間接法二步法)
18088 HSV- II IgM 單純皰疹Ⅱ型病毒 IgM(間接法二步法)
18089 HSV- II IgM 單純皰疹Ⅱ型病毒 IgM (捕獲法,一步法)
18090 HSV- II IgM 單純皰疹Ⅱ型病毒 IgM (捕獲法,二步法)
18091 Anti-Ins 胰島素抗體(間接法二步法) 96T
18092 Anti-GAD *脫羧酶抗體(間接法二步法) 96T
18093 Ins 胰島素(間接法二步法) 96T
18094 C-Peptide C-肽(夾心法二步法) 96T
18095 破傷風抗體(雙抗原夾心法) 96T
18096 包蟲抗體IgG(間接法二步法)
18097 DAO(Rat diamine oxidase,DAO) ELISA Kit 大鼠二胺氧化酶 96T
18098 Mouse anti-red cell antibody ELISA Kit 小鼠抗紅細胞抗體 96T
18099 GCP-2/CXCL6(Human granulocyte chemotactic protein-2,GCP-2) ELISA Kit 人粒細胞趨化蛋白-2 96T
18100 SAA (Rabbit Serum amyloid A) ELISA Kit 兔血清淀粉樣蛋白A 96T
18101 C4 ELISA Kit 鮭魚補體蛋白4 96T
18102 MV IgG 麻疹病毒 IgG(間接法二步法)
18103 MV IgM 麻疹病毒 IgM(間接法二步法)
18104 COX IgG 柯薩奇病毒 IgG 混合型(間接法二步法)
18105 COX IgM 柯薩奇病毒 IgM 混合型(間接法二步法)
18106 COX IgG I 柯薩奇病毒 IgG Ⅰ(間接法二步法)
18107 COX IgM I 柯薩奇病毒 IgM Ⅰ(間接法二步法)
18108 COX IgG II 柯薩奇病毒 IgG Ⅱ(間接法二步法)
18109 COX IgG III 柯薩奇病毒 IgG Ⅲ(間接法二步法)
18110 COX IgG IV 柯薩奇病毒 IgG Ⅳ(間接法二步法)
18111 COX IgG V 柯薩奇病毒 IgG Ⅴ
18112 COX IgG VI 柯薩奇病毒 IgG Ⅵ(間接法二步法)
18113 RSV IgG 合胞病毒 IgG(間接法二步法)
18114 RSV IgM 合胞病毒 IgM(間接法二步法)
18115 ECV IgG 艾柯病毒 IgG(間接法二步法)
18116 ECV IgM 艾柯病毒 IgM(間接法二步法)
18117 Rotavirus IgG 輪狀病毒 IgG(間接法二步法)
18118 Rotavirus IgM 輪狀病毒 IgM(間接法二步法)
18119 ADV IgG III 腺病毒 IgG Ⅲ型(間接法二步法)
18120 ADV IgM III 腺病毒 IgM Ⅲ型(間接法二步法)
18121 ADV IgG VII 腺病毒 IgG Ⅶ型(間接法二步法)
18122 ADV IgM VII 腺病毒 IgM Ⅶ型(間接法二步法)
18123 ADV IgM XI 腺病毒 IgM Ⅺ型(間接法二步法)
18124 Hpt/HP (Rabbit Haptoglobin) ELISA Kit 兔結合珠蛋白/觸珠蛋白 96T
18125 Mouse carcinoembryonic antign,CEA ELISA Kit 小鼠癌胚抗原 96T
18126 IFN- Omega (Human Interferon Omega ,IFN- Omega ) ELISA Kit 人ω干擾素 96T
18127 IL-1 Alpha ELISA kit 人白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 魚類白介素1α 96T
18128 MT/MLT (Rat Melatonin,MT/MLT) ELISA Kit 大鼠褪黑素 96T
18129 ADV IgG XI 腺病毒 IgG Ⅺ型(間接法二步法)
18130 ADV IgG 腺病毒 IgG 混合型(間接法二步法)
18131 ADV IgM 腺病毒 IgM 混合型(間接法二步法)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人白介素6(IL-6)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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