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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
18188 CTX- I ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原C端肽 96T
18189 (IL-2sR)ELISA Kit 大鼠白介素2可溶性受體 96T
18190 cTnT (Rabbit cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit 兔心肌特異性肌鈣蛋白T 96T
18191 Cherax quadricarinatus lipovilin/vilin,Lv/Vn ELISA Kit 紅螯光殼螯蝦卵黃脂磷蛋白/卵黃磷蛋白 96T
18192 Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV ELISA Kit 羅氏沼蝦諾達病毒 96T
18193 OMgp-Ab ELISA Kit 小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體 96T
18194 (Ntn1)ELISA Kit 大鼠軸突生長誘向因子1 96T
18195 LZM (Rabbit Lysozyme) ELISA Kit 兔* 96T
18196 IFN- Beta/IFNB(Human Interferon Beta) ELISA Kit 人β干擾素 96T
18197 (LDH)ELISA Kit 大鼠乳酸脫氫酶 96T
18198 PRL (Rabbit prolactin) ELISA Kit 兔子催乳素 96T
18199 MUC5B ELISA Kit 小鼠粘蛋白/粘液素5B 96T
18200 Cobra venom factor,CVF ELISA Kit 毒蛇因子 96T
18201 sCD38(Human Soluble Cluster of differentiation 38) ELISA Kit 人可溶性CD38 96T
18202 CR2/sCD21(Human Soluble Cluster of differentiation 21) ELISA Kit 人可溶性CD21 96T
18203 PACAP ELISA Kit 小鼠垂體腺苷酸環化酶激活肽 96T
18204 human CHOP ELISA Kit 人內質網應激相關蛋白CHOP 96T
18205 (MAG Ab)ELISA Kit 大鼠抗髓鞘相關糖蛋白抗體 96T
18206 LH (Rabbit luteotropic hormone) ELISA Kit 兔子促黃體激素 96T
18207 sLR(Human Leptin Soluble Receptor) ELISA Kit 人可溶性瘦素受體 96T
18208 Bombyx mori Livetin,LT ELISA Kit 家蠶卵黃蛋白 96T
18209 ABAb (Rabbit anti-brain tissue antibody) ELISA Kit 兔抗腦組織抗體 96T
18210 (CTX- I )ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原C端肽 96T
18211 PSGL-1/CD162 ELISA Kit 小鼠抗PSGL-1/CD162 ELISA Kit 96T
18212 TLR-9/CD289(Human Toll-like receptor 9) ELISA kit 人Toll樣受體9 96T
18213 (pIKB Alpha)ELISA Kit 大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α
18214 p53 (Rabbit p53/tumor protein) ELISA Kit 兔p53 96T
18215 PS ELISA Kit 小鼠磷脂酰* 96T
18216 Nasoniavitripennis vilogenin,Vtg ELISA Kit 蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原 96T
18217 PC/CPG ELISA Kit 小鼠*磷酸甘油酯 96T
18218 TGF Beta2(Human transforming growth factors Beta2) ELISA Kit 人轉化生長因子β2 96T
18219 BAX (Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein) ELISA Kit 兔Bcl-2相關X蛋白 96T
18220 (NF-KapB)ELISA Kit 大鼠核因子κB 96T
18221 Plant phosphatidylglycerol,PG ELISA Kit 植物磷脂酰甘油 96T
18222 ADR (Rabbit adramycin) ELISA Kit 兔* 96T
18223 I CTP ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽 96T
18224 (DC-SIGN/CD209)ELISA Kit 大鼠樹突狀細胞表面特異性C型凝集素-細胞間黏附分子3結合非整合素分子 96T
18225 Plant zeatin riboside,ZR ELISA Kit 植物玉米索核苷 96T
18226 MCP-4/CCL13(Human monocyte chemotactic protein 4) ELISA kit 人單核細胞趨化蛋白4 96T
18227 Plant Gibberellic Acid,GA ELISA Kit 植物赤霉素 96T
18228 MMP-2/Gelatinase A (Rabbit matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA Kit 兔基質金屬蛋白酶2/明膠酶A 96T
18229 Mouse Anti-nuclear Antibody,ANA ELISA Kit 小鼠抗核抗體 96T
18230 (P I NP)ELISA Kit 大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽 96T
18231 LTD4(Human leukotriene D4) ELISA Kit 人白三烯D4 96T
18232 (ADAM9)ELISA Kit 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9 96T
18233 KLH ELISA Kit 人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白 96T
18234 OSM (Rabbit Oncostatin-M) ELISA Kit 兔抑瘤素M 96T
18235 N-Cad(Human Neural-Cadherin) ELISA kit 人N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白 96T
18236 phytohaemagglutinin,PHA ELISA Kit 植物血凝素 96T
18237 ANG-2 (Rabbit Angiopoietin 2) ELISA Kit 兔血管生成素2 96T
18238 大鼠c-fos ELISA Kit 大鼠c-fos 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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