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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-21 21:30:29瀏覽次數(shù):308次
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人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
18239 ADAM9 ELISA Kit 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9 96T
18240 HB-EGF(Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor) ELISA Kit 人肝素結(jié)合性表皮生長因子 96T
18241 Plant growth hormone,GH ELISA Kit 植物生長激素 96T
18242 Plant phosphatidic acid,PA ELISA Kit 植物凝脂酸 96T
18243 Mouse oxidizided glutathione,GSSG ELISA Kit 小鼠氧化型* 96T
18244 大鼠c-jun ELISA Kit 大鼠c-jun ELISA Kit 96T
18245 ESF(Human erythropoiesis stimulating factor) ELISA Kit 人紅細(xì)胞刺激因子 96T
18246 ANG- II (Rat angiotension II ) ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ 96T
18247 Mouse reduced glutathione,GSH ELISA Kit 小鼠還原型* 96T
18248 sFAS/Apo-1 (Rabbit soluble Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 兔可溶性凋亡相關(guān)因子 96T
18249 TRANCE(Human TNF related activation induced cytokine) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子 96T
18250 sIL-6R ELISA Kit 大鼠可溶性白介素6受體 96T
18251 Plant Indole-3-acetic acid ,IAA ELISA Kit 植物吲哚乙酸 96T
18252 PYD ELISA Kit 大鼠吡啶酚 96T
18253 GH-RF(Human growth hormone relasing factor) ELISA Kit 人生長激素釋放因子 96T
18254 Wheat germ agglutinin,WGA ELISA Kit 麥胚凝集素/凝集蛋白 96T
18255 Mouse Troponin T,Tn-T ELISA Kit 小鼠肌鈣蛋白T 96T
18256 6-keto-PGF1a (Rabbit 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 兔6酮前列腺素F1a 96T
18257 Mouse c-fos ELISA Kit 小鼠c-fos 96T
18258 BACE2 ELISA Kit 大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2 96T
18259 Ulex Europaeus agglutinin,UEA ELISA Kit 荊豆凝集素 96T
18260 TXB2 (Rabbit Thromboxane B2) ELISA Kit 兔血栓素B2 96T
18261 MCF(Human macrophage chemotatic factor) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞趨化因子 96T
18262 VCAM-1/CD106 (Rabbit Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit 兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 96T
18263 Mouse c-jun ELISA Kit 小鼠c-jun 96T
18264 IFN- Alpha/ BetaR(Human Interferon Alpha/ BetaReceptor) ELISA Kit 人α/β干擾素受體 96T
18265 Sophora japonica agglutinin,SJA ELISA Kit 槐凝集素 96T
18266 BALP ELISA Kit 大鼠骨堿性磷酸酶 96T
18267 BCGF(Human B cell growth protein) ELISA Kit 人B細(xì)胞生長因子 96T
18268 Fbg (Rabbit Fibrinogen) ELISA Kit 兔血纖蛋白原 96T
18269 CLU ELISA Kit 大鼠凝聚素 96T
18270 Peanut agglutinin,PNA ELISA Kit 花生凝集素 96T
18271 Mouse anti-zona pellucida antibody,aZP ELISA Kit 小鼠抗透明帶抗體 96T
18272 BCDF(Human B cell differetiation factor) ELISA Kit 人B細(xì)胞分化因子 96T
18273 Mouse Mucin-7,MUC7 ELISA Kit 小鼠粘蛋白/粘液素7 96T
18274 Soybean agglutinin,SBA ELISA Kit 大豆凝集素 96T
18275 D2D (Rabbit D-Dimer) ELISA Kit 兔子D二聚體 96T
18276 Phaseolus vulgaris agglutinin,PHA ELISA Kit 菜豆凝集素 96T
18277 IL-1sR I (Rabbit soluble interleukin-1 receptor I ) ELISA Kit 兔子白介素1可溶性受體I 96T
18278 Mouse eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白 96T
18279 IL-32 ELISA Kit 大鼠白介素32 96T
18280 Ep-CAM/CD362(Human Epithelial Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 人上皮細(xì)胞粘附分子 96T
18281 PROGR ELISA kit 大鼠孕酮受體 96T
18282 Lens culinaris agglutinin,LCA ELISA Kit 扁豆凝集素 96T
18283 Mouse Qa lymphocyte antigen 2 region,Qa-2 ELISA Kit 小鼠Qa淋巴細(xì)胞抗原2 96T
18284 Lep IgG (Rabbit Leptospira IgG) ELISA Kit 兔鉤端螺旋體IgG 96T
18285 Sam(Human soluble adhesion molecules) ELISA Kit 人可溶性粘附分子 96T
18286 AmAC-1(Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1 96T
18287 IL-21 ELISA Kit 人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 大鼠白介素21 96T
18288 Ricinus communis agglutinin,RCA ELISA Kit 蓖麻凝集素 96T
18289 Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit 小鼠D-乳酸脫氫酶 96T
18290 F1+2 (Rabbit prothrombin fragment 1+2) ELISA Kit 兔*原片段F1+2 96T
18291 ADM (Rabbit soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 兔子腎上腺髓質(zhì)素 96T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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