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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
18293 VEGFR-2/sFLK-1(Human soluble vascular endothelial growth factor receptor-2) ELISA Kit 人可溶性血管內皮生長因子受體2 96T
18294 Pisum sativum agglutinin,PSA ELISA Kit 豌豆凝集素 96T
18295 Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA kit 小鼠孕酮受體 96T
18296 Dolichos bifows agglutinin,DBA ELISA Kit 雙花扁豆凝集素 96T
18297 TSLP(Human thymic stromal lymphopoietin) ELISA Kit 人胸腺基質淋巴細胞生成素 96T
18298 TARC/CCL17 ELISA Kit 大鼠胸腺活化調節趨化因子 96T
18299 sEPCR (Rabbit soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 兔子可溶性血管內皮細胞蛋白C受體 96T
18300 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA kit 小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6 96T
18301 CH ELISA Kit 大鼠* 96T
18302 Lp- Alpha (Rabbit lipoprotein Alpha) ELISA Kit 兔脂蛋白α 96T
18303 PF/PFP(Human Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit 人穿孔素/成孔蛋白 96T
18304 Plant calmodulin,CAM ELISA Kit 植物鈣調素 96T
18305 Mouse pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA Kit 小鼠肺部活化調節趨化因子 96T
18306 PTN(Human pleiotrophin) ELISA Kit 人多效生長因子 96T
18307 Apo-E (Rabbit Apolipoprotein E) ELISA Kit 兔載脂蛋白E 96T
18308 TG mouse ELISA Kit 小鼠甘油三酯 96T
18309 Plant hormone abscisic acid,ABA ELISA Kit 植物激素脫落酸 96T
18310 Mouse Lysozyme,LZM ELISA Kit 小鼠* 96T
18311 valosin-containing protein kit/VCP (human) 人含纈酪肽蛋白 96T
18312 sCD28(human soluble cluster of differentiation 28) ELISA Kit 人可溶性CD28 96T
18313 Mouse Beta-catenin, Beta-cat ELISA Kit 小鼠β連環蛋白/聯蛋白 96T
18314 LDL ELISA Kit 大鼠低密度脂蛋白 96T
18315 Plant Vitamin K1,VK1 ELISA Kit 植物*1 96T
18316 apo-B100 (Rabbit apoprotein B100) ELISA Kit 兔載脂蛋白B100 96T
18317 Plant Vitamin B12,VB12 ELISA Kit 植物*12 96T
18318 HDL ISA Kit 大鼠高密度脂蛋白 96T
18319 Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit 小鼠垂體腺苷酸環化酶激活肽 96T
18320 Human lymphocyte factor ELISA Kit 人淋巴細胞因子 96T
18321 TGF Beta2 (Rabbit transforming growth factor Beta2) ELISA Kit 兔轉化生長因子β2 96T
18322 NOS (Rabbit nitric oxide synthase) ELISA Kit 兔一氧化氮合成酶 96T
18323 Plant Vitamin A,VA ELISA Kit 植物* 96T
18324 Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA Kit 小鼠血管緊張素轉化酶 96T
18325 TARC/CCL17(Human thymus activation regulated chemokine) ELISA Kit 人胸腺活化調節趨化因子 96T
18326 PGR ELISA Kit 大鼠孕酮受體 96T
18327 Mouse angiotension II ,ANG- II ELISA Kit 小鼠血管緊張素Ⅱ 96T
18328 Plant Vitamin E,VE EELISA Kit 植物* 96T
18329 eNOS (Rabbit Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 兔內皮型一氧化氮合成酶 96T
18330 NCAM-L1/CD171(Human Neural cell adhesion molecule ligand 1) ELISA Kit 人神經細胞粘附分子配體1 96T
18331 ACE II ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ轉化酶 96T
18332 ACE I ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅰ轉化酶 96T
18333 PLAUR/uPAR (Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA Kit 兔*型纖溶酶原激活物受體 96T
18334 Plant Vitamin D2,VD2 ELISA Kit 植物*2 96T
18335 Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 小鼠角化細胞內分泌因子/雙調蛋白 96T
18336 CVNPF(Human Cobra venom neuronal protective factor) ELISA Kit 人神經保護因子 96T
18337 sTNF AlphaR(Human soluble Tumor Necrosis Factor Alphareceptor) ELISA Kit 人可溶性腫瘤壞死因子α受體 96T
18338 ACV-A (Mouse Activin A) ELISA Kit 小鼠活化素A 96T
18339 uPA (Rabbit urokinase plasminogen activator) ELISA Kit 兔*型纖溶酶原激活物 96T
18340 GnRHR ELISA Kit 大鼠*釋放激素受體 96T
18341 Plant Vitamin D3,VD3 ELISA kit 植物*3 96T
18342 sCKR(Human soluble cytokine receptor) ELISA Kit 人可溶性細胞因子受體 96T
18343 AMPK ELISA Kit 人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試劑盒大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 96T
18344 hs-CRP (Rabbit high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit 兔超敏C反應蛋白 96T
18345 BDNF(Mouse Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 小鼠腦源性神經營養因子 96T
18346 Plant Vitamin D,VD ELISA Kit 植物* 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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