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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發,提高試驗質量。
18939 ACA-IgM ELISA Kit 大鼠抗心磷脂抗體IgM 96T
18940 ACA-IgA ELISA Kit 大鼠抗心磷脂抗體IgA 96T
18941 OT/BGP(Mouse Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA Kit 小鼠骨鈣素/骨*蛋白 96T
18942 Human CA724 ELISA Kit 人腫瘤標志物 96T
18943 GABA(Mouse Gamma-aminobutyric acid) ELISA Kit 小鼠γ氨基丁酸 96T
18944 NGAL(Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin) ELISA Kit 人中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白 96T
18945 AP12 ELISA Kit 大鼠apelin 12 96T
18946 IFN- Alpha ELISA Kit 大鼠α干擾素 96T
18947 LTA(Human nonsmall cell lung cancer/Lung tumor Antigen) ELISA Kit 人非小細胞肺癌抗原 96T
18948 5-HT(Mouse 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 小鼠5羥色胺 96T
18949 DR-70TM(Human tumor marker DR-70 for lung cancer) ELISA Kit 人肺癌標志物DR-70 96T
18950 SP-R(Mouse substance P receptor) ELISA Kit 小鼠P物質受體 96T
18951 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測 96T
18952 F II ELISA Kit 大鼠*Ⅱ 96T
18953 SP(Mouse Substance P) ELISA Kit 小鼠P物質 96T
18954 FSA(Human fetal sulfoslycoprotein antigen) ELISA Kit 人胚胎性硫糖蛋白抗原 96T
18955 BJP(Human Bence-Jones protein) ELISA Kit 人本周蛋白 96T
18956 VIP(Mouse Vasoactive Intestinal Peptide) ELISA Kit 小鼠血管活性腸肽 96T
18957 ET ELISA Kit 大鼠內毒素 96T
18958 PPAR- Gamma ELISA Kit 大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ 96T
18959 TPO(Mouse Thyroid-Peroxidase) ELISA Kit 小鼠甲狀腺過氧化物酶 96T
18960 CEF(Human Carcinoembryonic Ferritin) ELISA Kit 人癌胚鐵蛋白 96T
18961 AFU(Mouse alpha-L-fucosidase) ELISA Kit 小鼠αL巖藻糖苷酶 96T
18962 SCCAg(Human squamous cell carcinoma related antigen) ELISA Kit 人鱗狀細胞癌相關抗原 96T
18963 CsA ELISA Kit 大鼠*A 96T
18964 hs-CRP ELISA Kit 大鼠超敏C反應蛋白 96T
18965 TSA(Human tumor specific antigen) ELISA Kit 人腫瘤特異性抗原 96T
18966 BK(Mouse bradykinin) ELISA Kit 小鼠血管舒緩激肽 96T
18967 PI(Mouse Proinsulin) ELISA Kit 小鼠胰島素原 96T
18968 MMSAM(Human melanoma metastasis surface adhesion molecule) ELISA Kit 人黑色素瘤轉移表面黏附分子 96T
18969 Beta2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit 大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M 96T
18970 EMAb ELISA Kit 大鼠抗子宮內膜抗體 96T
18971 BRCA-2(Human breast cancer susceptibility protein 2) ELISA Kit 人乳腺癌易感蛋白2 96T
18972 (Mouse anti-IgE receptor antibody) ELISA Kit 小鼠抗IgE受體抗體 96T
18973 ASK-1(Human apoptosis signal regulating kinase 1) ELISA Kit 人凋亡信號調節激酶I 96T
18974 (Mouse anti-IVIgG antibody) ELISA Kit 小鼠抗IVIgG抗體 96T
18975 LDL-IC ELISA Kit 大鼠低密度脂蛋白免疫復合物 96T
18976 15-LO/LOX ELISA Kit 大鼠15脂加氧酶 96T
18977 BAX(Human Bcl-2 associated X protein) ELISA Kit 人Bcl-2相關X蛋白 96T
18978 AMA(Mouse Anti-myocardial antibody) ELISA Kit 小鼠抗心肌抗體 96T
18979 TF(Human Transfer factor) ELISA Kit 人轉移因子 96T
18980 Tn- I ELISA Kit 大鼠肌鈣蛋白Ⅰ 96T
18981 CP/CER(Mouse Ceruloplasmin) ELISA Kit 小鼠銅藍蛋白 96T
18982 SAA ELISA Kit 大鼠血清淀粉樣蛋白A 96T
18983 CCA(Human Colon Cancer Antigen) ELISA Kit 人結腸癌抗原 96T
18984 p53(Mouse p53/tumor protein) ELISA Kit 小鼠p53 96T
18985 cGMP(Mouse Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit 小鼠環磷酸鳥苷 96T
18986 Human H-ras ELISA Kit 人H-ras 96T
18987 Hpt/HP ELISA Kit 大鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白 96T
18988 Alpha1-AGP ELISA Kit 大鼠α1酸性糖蛋白 96T
18989 NOS(Mouse nitric oxide synthase) ELISA Kit 小鼠一氧化氮合成酶 96T
18990 Human c-sis ELISA Kit 人胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒人c-sis 96T
18991 iNOS(Mouse inducible nitric oxide synthase) ELISA Kit 小鼠誘導型一氧化氮合成酶 96T
18992 eNOS-3 ELISA Kit 大鼠內皮型一氧化氮合成酶3 96T
18993 Human c-jun ELISA Kit 人c-jun 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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