人胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

18995 eNOS(Mouse Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit  小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶  96T
18996 CETP ELISA Kit  大鼠*酯轉(zhuǎn)移蛋白  96T
18997 aGT ELISA Kit  大鼠血管緊張素原  96T
18998 HIS(Mouse Histamine) ELISA Kit  小鼠組胺  96T
18999 c-myc(Human c-myc Oncogene product) ELISA Kit  人c-myc癌基因產(chǎn)物  96T
19000 Smad1(Human Mothers against decapentaplegic homolog 1) ELISA Kit  人Smad1  96T
19001 Hsp-60 ELISA Kit  大鼠熱休克蛋白60  96T
19002 Lp-PL-A2(Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit  小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2  96T
19003 HSP-90(Mouse Heat Shock Protein 90) ELISA Kit  小鼠熱休克蛋白90  96T
19004 MDA ELISA Kit  大鼠丙二醛  96T
19005 Smad7(Human Mothers against decapentaplegic homolog 7) ELISA Kit  人Smad7  96T
19006 SOD ELISA Kit  大鼠超氧化物歧化酶  96T
19007 TAA(Human tumor-associated antigen) ELISA Kit  人腫瘤相關(guān)抗原  96T
19008 HSP-70(Mouse Heat Shock Protein 70) ELISA Kit  小鼠熱休克蛋白70  96T
19009 ADP(Mouse adiponectin) ELISA Kit  小鼠脂聯(lián)素  96T
19010 HSP gp96 ELISA Kit  大鼠熱休克蛋白糖蛋白96  96T
19011 TIEG1(Human TGF-beta-inducible early response gene-1) ELISA Kit  人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1  96T
19012 TAF(Human tumor angiogenesis factors) ELISA Kit  人腫瘤血管生長(zhǎng)因子  96T
19013 Hsp-40(Mouse Heat Shock Protein 40) ELISA Kit  小鼠熱休克蛋白40  96T
19014 CH50 ELISA Kit  大鼠血清總補(bǔ)體  96T
19015 B7-2/sCD86 ELISA Kit  大鼠可溶性CD86  96T
19016 CK-20(Human cytokeratin 20) ELISA Kit  人細(xì)胞角蛋白20  96T
19017 A Beta1-40(Mouse amyloid beta peptide 1-40) ELISA Kit  小鼠β淀粉樣蛋白  96T
19018 CK-19(Human cytokeratin 19) ELISA Kit  人細(xì)胞角蛋白19  96T
19019 IL-8/CXCL8(Mouse interleukin 8) ELISA Kit  小鼠白介素8  96T
19020 HIF-1 Alpha ELISA Kit  大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α  96T
19021 Amylin ELISA Kit  大鼠胰淀素  96T
19022 Cyclin-D3(Mouse Cyclin-D3) ELISA Kit  小鼠細(xì)胞周期素D3  96T
19023 CK-18(Human cytokeratin 18) ELISA Kit  人細(xì)胞角蛋白18  96T
19024 Cyclin-D2(Mouse Cyclin-D2) ELISA Kit  小鼠細(xì)胞周期素D2  96T
19025 CgA(Human Chromogranin) ELISA Kit  人嗜鉻蛋白A  96T
19026 LTC4 ELISA Kit  大鼠白三烯C4  96T
19027 Cyt-C ELISA Kit  大鼠*  96T
19028 pRB(Human retinoblastoma tumor suppressor protein) ELISA Kit  人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白  96T
19029 E(Mouse estrogen) ELISA Kit  小鼠雌激素  96T
19030 Ang- I ELISA Kit  大鼠血管緊張素Ⅰ  96T
19031 Cyclin-D1(Mouse Cyclin-D1) ELISA Kit  小鼠細(xì)胞周期素D1  96T
19032 MBP(Mouse myelin basic protein) ELISA Kit  小鼠髓磷脂堿性蛋白  96T
19033 MPF(Human maturation promoting factor) ELISA Kit  人成熟促進(jìn)因子  96T
19034 MC Ab ELISA Kit  大鼠黑色素細(xì)胞抗體  96T
19035 TGF- Alpha(Mouse transforming growth factor Alpha) ELISA Kit  小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α  96T
19036 ASGPR(Human asialoglyco protein receptor) ELISA Kit  人去唾液酸糖蛋白受體  96T
19037 DPP IV ELISA Kit  大鼠二肽基肽酶Ⅳ  96T
19038 C4a ELISA Kit  大鼠過敏毒素/補(bǔ)體片斷4a  96T
19039 sTfR(Human soluble transferrin receptor) ELISA Kit  人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體  96T
19040 AFP(Mouse Alpha-fetoprotein) ELISA Kit  小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白  96T
19041 MT(Human Metallothionein) ELISA Kit  人金屬硫蛋白  96T
19042 PAP(Mouse Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit  小鼠前列腺酸性磷酸酶  96T
19043 C5a ELISA Kit  大鼠補(bǔ)體片斷5a  96T
19044 C3a ELISA Kit  人胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒大鼠補(bǔ)體片斷3a  96T
19045 PSA(Mouse prostate specific antigen) ELISA Kit  小鼠前列腺特異性抗原  96T
19046 AFP-L3(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3) ELISA Kit  人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3  96T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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